M M A A T T É É R R I I E E L L S S N N É É C C E E S S S S A A I I R R E E S S N N O O N N F F O O U U R R N N I I S S
Réf. 4063 Chambre de migration SAS-MX
Réf. 1525 Générateur EPS600
Réf. 5328 AA
Hémo contrôle
2
Réf. 5329 ASA
Hémo contrôle
2
Réf. 5330 AFSA
Hémo contrôle
2
Réf. 5331 AFSC Hémo contrôle
Étuve de séchage à convection forcée offrant une température entre 60...70°C
Solution fixative / décolorante : Mélanger 200ml de méthanol avec 100ml d'acide acétique glacial et
800ml d'eau distillée. Conserver en bouteille hermétiquement fermée.
Solution physiologique (0,85% NaCl)
Eau distillée
P P R R É É L L È È V V E E M M E E N N T T S S D D E E S S É É C C H H A A N N T T I I L L L L O O N N S S
L'utilisation de sang total fraîchement prélevé sur EDTA ou héparine est fortement recommandée.
Les échantillons peuvent être conservés 1 semaine entre 2...6 °C. Pour un résultat optimal, les globules
rouges doivent être lavés avec de la solution physiologique avant la préparation de l'hémolysat.
Cette étape évite l'interaction des protéines plasmatiques.
a) Mélanger 200µl de sang total mélangé avec 1000µl de solution physiologique.
b) Centrifuger jusqu'à sédimentation des hématies.
c) Retirer 1000µl de surnageant.
d) Ajouter à nouveau 1000µl de solution physiologique et mélanger.
e) Répéter les étapes b à d deux fois.
f)
Après la dernière centrifugation, retirer 1000µl de surnageant et traiter l'échantillon comme un
sang total ou bien retirer tout le surnageant et traiter comme des hématies lavées.
Diluer chaque échantillon / contrôle avec l'hémolysant afin d'obtenir une concentration en hémoglobine
entre 0,5 et 1,5g/dl.
M M É É T T H H O O D D O O L L O O G G I I E E
1. Sortir le gel de son emballage et le déposer sur un papier absorbant. Sécher la surface du gel à
l'aide d'un buvard C, jeter le buvard.
2. Disposer le masque applicateur échantillon en faisant correspondre les flèches avec les 2 fentes
latérales. Placer un buvard A sur le masque et passer délicatement le doigt sur les fentes afin
d'assurer un contact optimal. Retirer le buvard A et le conserver pour l'étape 5.
3. Déposer 3µl d'échantillon sur chaque fente et laisser absorber 5 minutes.
4. Pendant ce temps, verser 30ml de tampon dans chaque compartiment intérieur de la chambre de
migration SAS-MX.
5. Une fois l'absorption de l'échantillon terminée, sécher le masque applicateur avec le buvard A
conservé à l'étape 2 puis enlever le buvard et le masque applicateur.
6. Placer le gel, agarose vers le bas, dans la chambre de migration, en respectant les polarités.
7. Faire migrer à 50 volts pendant 30 minutes.
8. Une fois l'électrophorèse terminée, plonger le gel dans la solution fixative / décolorante pendant 5
minutes.
9. Plonger le gel dans le colorant pendant 15 minutes.
10. Rincer le gel brièvement avec la solution fixative / décolorante afin d'éliminer l'excès de colorant
puis sécher le gel dans une étuve ventilée entre 60...70°C.
9
SAS-MX HB-10 ACIDE
Fran ç ais