Tiempos De Retención - Waters HPLC Diagnóstico Y Corrección De Anomalías

Tiempos de retención Tiempos de retención
Tiempos de
retención erráticos
Tiempos erráticos
Equilibrado de sistema y fase móvil
Pulsaciones de bomba, presión inestable
Fugas en algun punto del equipo
Volumen de inyección o concentración de Volumen de inyección o concentración de
muestra demasiado alta, disrupción del
equilibrio
Fluctuaciones temperatura
Mezcla inadecuada de los solventes
Contaminación de columna
Mirar condiciones de la aplicación para determinar el equilibrado.
Si es gradiente, observar el tiempo de equilibrado entre iny e iny.
Si se usa par iónico, asegurarse que en el primer uso de la columna,
está perfectamente equilibrada.
Purgar bombas con metanol. Sonicar check valves.
Chequear si hay fugas. Medir el flujo a la salida de detector. Si es
menor del marcado puede que haya fugas
Reducir el vol de inyección o bien diluirlo con f.m. Si se utiliza un Reducir el vol de inyección o bien diluirlo con f.m. Si se utiliza un
solvente más débil que la f.m, se puede inyectar un 10% del volumen
de la columna, pero si este solvente es más fuerte, tan sólo un 1%.
Columna a 5 grados por encima de la temperatura ambiente
Observar ubicación de equipos respecto a unidades de calor o frio.
Confirmar que el estabilizador se usa.
Para confirmar un problema de mezcla:
-hacer la premezcla, filtrar, desgasificar
-usar vías diferentes
-equilibrar la columna
-inyectar un std un mínimo de 3 veces y comparar los tr.
Si los tr son reproducibles con la mezcla prehecha, indica un
problema de mezcla:
-verificar miscibilidad
-verificar bomba y mixer
-ver "ruido de base cíclico"
-Pasar orgánico a la columna (tener en cuenta posibles
precipitaciones!!)
-limpiar o reemplazar columna
-volver a inyectar
-si el tr es errático: mirar solventes, contaminación de f.m o de
precolumna o filtro inline
©2007 Waters Corporation 137