Qiagen QIAamp 61904 Instrucciones De Uso página 35

Solo se debe utilizar etanol ya que el uso de otros alcoholes puede reducir el rendimiento
y la pureza del ARN. No utilice alcohol desnaturalizado, que contiene otras sustancias
como metanol o metiletilcetona. Si el volumen de la muestra es mayor a 140 µl, incremente
la cantidad de etanol de manera proporcional (por ejemplo, una muestra de 280 µl
requerirá 1120 µl de etanol). Para que la unión sea eficaz, es esencial que la muestra
y el etanol se mezclen bien a fin de obtener una solución homogénea.
6. Dispense cuidadosamente 630 µl de la solución obtenida en el paso 5 en la columna de
centrifugación QIAamp Mini (en un tubo de lavado [WT]) procurando no mojar el borde.
Cierre la tapa y centrifugue a aproximadamente 6000 × g durante al menos 1 minuto.
Ponga la columna de centrifugación QIAamp Mini en un tubo de lavado (WT) limpio de
2 ml y deseche el tubo de lavado que contiene el filtrado.
Selle cada columna de centrifugación para evitar que haya una posible contaminación
cruzada durante la centrifugación.
La centrifugación se debe realizar a aproximadamente 6000 × g para limitar el ruido de la
microcentrifugadora. La centrifugación a máxima velocidad no afectará al rendimiento ni a la
pureza del ARN vírico. Si la solución todavía no ha atravesado completamente la membrana,
repita el centrifugado a una velocidad mayor hasta que toda la solución haya atravesado.
7. Abra cuidadosamente la columna de centrifugación QIAamp Mini y repita el paso 6.
Repita este paso hasta que todo el lisado se haya cargado en la columna de centrifugación.
8. Abra cuidadosamente la columna de centrifugación QIAamp Mini y añada 500 µl de
Buffer AW1. Cierre la tapa y centrifugue a aproximadamente 6000 × g durante al menos
1 minuto. Ponga la columna de centrifugación QIAamp Mini en un tubo de lavado (WT)
limpio de 2 ml y deseche el tubo de lavado que contiene el filtrado.
No es necesario aumentar el volumen del Buffer AW1, incluso si el volumen original de
la muestra era mayor a 140 µl.
9. Abra cuidadosamente la columna de centrifugación QIAamp Mini y añada 500 µl de
Buffer AW2. Cierre la tapa y centrifugue a velocidad máxima (aproximadamente
20.000 × g) durante 3 minutos ± 30 segundos.
Instrucciones de uso del QIAamp DSP Viral RNA Mini Kit (manual de uso) 01/2021 35