Unidades de energía
La alternativa a las unidades de emisión son las unidades de energía, similares
a las usadas por los detectores de fluorescencia HPLC tradicionales.
Correlacionan directamente con la corriente anódica del PMT, con lo que están
directamente influenciados por los parámetros de ganancia. Todas las variables
instrumentales, como la intensidad de la lámpara, eficiencia óptica y ganancia,
influencian directamente en la intensidad de la señal de emisión. Como
resultado, las unidades de energía son menos fiables. No obstante, al calcular
las unidades de energía para cumplir con los protocolos establecidos, se debe
usar la siguiente aecuación:
EU = Recuentos PMT × K × (Recuentos de referencia
referencia
donde K aumenta la máxima señal de fluorescencia detectable a 10.000
unidades.
Referencias
Consultar los siguientes textos para obtener información adicional sobre la
detección de fluorescencia:
N. Ichinose, G. Schwedt, F. M. Schnepel y K. Adachi, Fluorometric Analysis in
Biomedical Chemistry (Análisis fluorométrico en la química biomédica),
Capítulo 5, Wiley-Interscience: Nueva York, 1991.
E. S. Yeung, ed., Detectors for Liquid Chromatography (Detectores para la
cromatografía líquida), Capítulo 5, Wiley: Nueva York,1986.
W. R. Seitz, en Treatise on Analytical Chemistry (Tratado sobre química
analítica), 2ª Ed., P. J. Elving, E. J. Meehan, I. M. Kolthoff, eds., Parte I, Vol. 7,
Capítulo 4, Wiley: Nueva York, 1981.
J. R. Lakowicz, Principles of Fluorescence Spectroscopy (Principios de la
espectroscopia de fluorescencia), Plenum: Nueva York, 1983.
S. G. Schulman, Fluorescence and Phosphorescence Spectroscopy:
Physicochemical Principles and Practice (Espectroscopia de fluorescencia y
fosforescencia: Principios y prácticas físico-químicas), Pergamon Press: Nueva
York, 1977.
J. D. Winefordner, S. G. Schulman y T. C. O'Haver, Luminescence Spectroscopy
in Analytical Chemistry (Espectroscopia de luminiscencia en la química
analítica), Wiley-Interscience: Nueva York, 1972.
)
t
/ Recuentos de
0
Medición de la fluorescencia
1-7