Datos De Fluorescencia - Waters ACQUITY UPLC Guia De Inicio Rapido

Datos de fluorescencia

Los detectores presentan sus datos en unidades de intensidad (emisión) o
energía de fluorescencia. El Detector FLR también indica la intensidad usando
unidades normalizadas para compensar la variabilidad entre detectores
individuales y la posible disminución de la intensidad de la lámpara relacionada
con el paso del tiempo. Al usar unidades normalizadas, los cambios de ganancia
mejoran la relación señal-ruido, pero no cambian la respuesta de los picos, lo que
confiere un alto grado de reproducibilidad de las mediciones de las señales
fluorescentes.
Unidades de emisión y normalización
El Detector FLR ofrece dos tipos de unidades de señal: emisión y energía. Las
unidades de emisión se normalizan a una referencia de agua estándar, y su
magnitud es tan independiente de la ganancia del fotomultiplicador (PMT) como
sea posible. Se puede compensar los cambios que normalmente influyen en la
intensidad de la señal de las mediciones de fluorescencia, como degradaciones
ópticas o de la lámpara, renormalizando periódicamente a la referencia de agua
estándar. Esta renormalización reduce las variaciones de la intensidad de las
señales de fluorescencia de un detector a otro.
La siguiente ecuación sirve para calcular el valor de las unidades de emisión
(EU) en cualquier momento (t):
EU = (Recuentos PMT
t
donde
Ganancia
función de normalización de unidades.
Recuentos PMT
datos.
La normalización de las unidades de emisión tiene como resultado un valor de
relación de la intensidad de la señal agua/Raman, en E
100 unidades de emisión. La señal del espectro de mercurio-xenón no es
uniforme a lo largo del intervalo operativo del detector y las longitudes de onda
UV bajas pueden degradarse más deprisa que las longitudes de onda de
normalización.
1-6 Teoría de funcionamiento
/ Ganancia
t
y Recuentos
Raman Raman
y Ganancias
t
) × (Ganancia
.
= valores de la ejecución más reciente de la
= valores en el momento de la recopilación de
t
/ Recuentos
Raman Raman
365 nm/E 416 nm, de
x m
) × 100