helena BioSciences SAS-3 Immunofix Instrucciones De Uso página 28

PROCEDURA
1. Programmare i seguenti parametri nella strumentazione:
Passo
Elettroforesi
Caricamento campione
Applicazione campione
Elettroforesi
Applicazione antisieri
Inserimento pettini
Blotter D
Asciugatura
Utilizzare la posizione 2 per lo SPIFE 3000 o SAS-3.
NOTE 1: Per l' immunofissazione del siero, è necessaria 1 applicazione del campione.
Per l'immunofissazione delle urine, sono necessarie 10 applicazioni.
Nota2: I campioni di urina e siero possono essere utilizzati simultaneamente su un unico gel.
Ogni singola fila deve contenere soltanto un unico tipo di campione (ad es. file 2 e 8 = urina, fila 14 =
siero) Qualora una combinazione di campioni di siero e urine dovesse essere utilizzata sullo stesso gel,
accertarsi che per le prime 9 fasi di caricamento/applicazione vengano inserite nella SAS-3 le lamelle
per campioni di urine. Aggiungere le lamelle di applicazione per i campioni di siero unicamente per la
(10a) applicazione di caricamento finale.
Colorazione
Lavaggio
Lavaggio
Colorante
Decolorante
Decolorante
Asciugatura
2. Collocare il numero esatto di lamelle di applicazione sullo strumento:
Numero di campioni
9
6
3
3. i) Solo per SPIFE Combo: Pipettare 17µl di siero in ciascun pozzetto portacampioni. Proteggere
i campioni dall'evaporazione.
ii) Solo per SPIFE 2000 / 3000 / SAS-3: Pipettare 35µl di siero in nelle cuvette monouso.
Proteggere i campioni dall'evaporazione.
4. Rimuovere il gel dalla confezione ed eliminare il foglio protettivo.
5. Dispensare 2ml di REP Prep nella camera elettroforetica e successivamente collocare il gel,
allineando i buchi del gel con i riferimenti nella camera, evitando la formazione di bolle sotto il gel.
Fissare gli elettrodi all'esterno dei puntali, in modo tale che entrino a contatto con i blocchi di gel.
6. Asciugare la superficie del gel con un blotter C, poi scartarlo.
Tempo (mm:ss) Temp (°C)
00:30 21
00:30 21
06:30 21
10:00 21
02:00 21
05:00 40
08:00
00:30
10:00
04:00
02:00
02:00
12:00 63
SPIFE Combo
4, 11, 18
4, 11
4
26
Voltaggio
650
Posizione applicatori
SPIFE 2000/3000 e SAS-3
Altro
Velocità 1
Velocità 1*
Ricircolo ON
Ricircolo ON
Ricircolo ON
Ricircolo ON
Ricircolo ON
2, 8, 14
2, 8
2