Limitaciones - helena BioSciences SAS-3 Immunofix Instrucciones De Uso

Inmunofijación de la orina:
Tipo de proteinuria
Orina normal
Glomerular
Tubular
Exceso

LIMITACIONES

1. Exceso de antígeno.
Se produce un exceso de antígeno cuando no hay anticuerpos ligeramente en exceso o una
equivalencia antígeno / anticuerpo en el lugar de la precipitación. El exceso de antígeno en IFE
suele deberse a un exceso de inmunoglobulina en la muestra del paciente. El exceso de antígeno
está caracterizado por la aparicion de efectos de zona (zonas sin colorear en el centro de la banda
proteínica inmunofijada, con coloración alrededor de los bordes). En este caso, deberá utilizarse
una dilución mayor de la muestra para optimizar la concentración de inmunoglobulina.
2. Precipitación no específica en todas las líneas de inmunoglobulinas.
De vez en cuando, una placa IFE terminada exhibe una banda de precipitado en la misma posición
en cada una de las calles de la placa. Esto puede ser el resultado de:
a) Inmunoglobulinas monoclonales IgM.
Las proteínas monoclonales IgM se pueden adherir a la matriz del gel. En 5 de las líneas de
antisuero del gel aparecerá una banda. Sin embargo, donde la banda reacciona con un antisuero
específico tanto para la cadena pesada como para la cadena ligera, habrá un incremento en el
tamaño y en la intensidad de coloración de la banda, permitiendo identificar el tipo de
inmunoglobulina. La dilución adicional de la muestra permitirá mejorar la discriminación entre la
reacción del anticuerpo IgM y la coloración no específica de la proteína IgM precipitada en las otras
líneas, simplificando el diagnóstico.
b) Altas concentraciones de FR o complejos inmunes.
Las muestras con altas concentraciones de factor reumatoide (FR) u otros complejos inmunes
pueden mostrar una banda de precipitado en el punto de aplicación de la muestra. Reduciendo la
muestra con DTT o β-2-mercaptoetanol se puede eliminar esta reacción no específica (mezclar
190µl de suero diluido con 10µl de un 1% (w/v) de DTT en un 0,85% de solución salina, o mezclar
100µl de suero con 10µl de una dilución 1:10 de β-2-mercaptoetanol en agua. Ejecutar el IFE de
la forma usual.
β-2-mercaptoetanol).
c) Fibrinógeno.
El fibrinógeno, cuando está presente en la muestra, mostrará una especie de banda discreta en
todas las líneas delpatrón de inmunofijación. El fibrinógeno está presente en el plasma y, algunas
veces, en el suero de pacientes a los que se está aplicando una terapia anticoagulante.
Bandas observadas en el gel
Pequeña banda de albúmina
Albúmina, alfa-1, beta, gamma
Alfa-1, alfa-2, beta
Gamma o variable
NOTA: trabajar siempre en una campana de humos cuando se utilice el
Proteínas presentes
Albúmina
Albúmina, alfa-1, antitripsina,
transferina, gammaglobulinas
Proteínas ligadas con retinol,
beta2-microglobulina,
alfa2-microglobulina
Inmunoglobulinas, cadenas
ligeras sueltas
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