Qiagen Rotor-Gene Q MDx Manual Del Usuario página 62

Para llevar a cabo esta técnica, es necesario disponer de la siguiente información acerca de la
serie:
La temperatura de desnaturalización inicial. Se trata de la misma temperatura que la del paso

de desnaturalización de un perfil de ciclado estándar.
La posición del tubo de la muestra de PCR que producirá una curva de disociación en el canal

verde.
Debe definirse un perfil de ciclado de desnaturalización óptica.

Cree un nuevo ciclo de desnaturalización óptica tal como se indica a continuación.
1. Abra la ventana Edit Profile (Editar perfil). A continuación, haga clic en New (Nuevo). En la
ventana que aparece, haga clic en el botón Insert after (Insertar después) y seleccione New
Cycling (Nuevo ciclado) en el menú. Seleccione uno de los pasos de temperatura haciendo clic
en el gráfico. En el menú desplegable, cambie Timed Step (Paso temporizado) por Optical
Denature (Desnaturalización óptica). Se mostrará un perfil predeterminado que contiene un
paso de desnaturalización y un paso de ciclo de desnaturalización óptica.
La región en rampa al comienzo de la serie representa el proceso de calibración. Los puntos
verdes representan las adquisiciones tomadas en cada ciclo durante el calentamiento. Los
puntos azules representan la adquisición al final del paso de hibridación a 60 °C. Tenga en
cuenta que, aunque el perfil muestra cada paso con la misma temperatura de
desnaturalización, puede que esta información no sea cierta. Si la muestra necesita algo más
de tiempo para disociarse hacia el final de la serie, el proceso de desnaturalización óptica
espera la disociación de acuerdo a los datos de fluorescencia, no a los de tiempo. Por este
motivo, el registro de la temperatura puede variar en cada ciclo.
2. Haga clic en la primera mitad del gráfico con el símbolo de desnaturalización óptica
el lado izquierdo de la pantalla, aparece la información Calibration Settings (Ajustes de
calibración).
Manual del usuario de Rotor-Gene Q MDx CE 02/2022
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