Métodos De Cinética - Riele Photometer 5010 V5+ Instrucciones De Operación

5010s_73.doc / 23.04.19
5.1.7 Métodos de cinética...
En una medición de cinética la absorbancia de la muestra es medida en forma secuencal en intervalos de
tiempo predeterminados.
El usuario puede definir tanto un tiempo de retraso como la cantidad y duración de los intervalos de tiempo
posteriores al tiempo de retraso (Deltas o Δt). Al principio y al final del tiempo de retraso se miden las
absorbancias ABS1 y ABS2. La diferencia |ABS.1 - ABS.2| permite distinguir entre actividades normales y
anormales.
A continuación se inicia una secuencia de medición en intervalos de tiempo equidistantes (Deltas o Δt). Los
resultados de estas mediciones forman una curva, como es mostrada en Fig. 5.1.7.1:
Fig. 5.1.7.1: Curva resultante de un test de cinética con absorbancia decreciente
Para cada intervalo de tiempo (Delta o Δt) es calculada la pendiente de la curva. Para obtener la alteración por
minuto A
, es necesario promediar los valores de pendiente calculados. Con este fin es aplicado un
M,Minuto
cálculo por regresión lineal simple, el cual entrega entre otras cosas un indicador para la linealidad de la
medición, el coeficiente de correlación R. Por razones prácticas en el cálculo de cinética es aplicado el
cuadrado del coeficiente de correlación R^2 o coeficiente de determinación. El valor de R^2 puede variar entre
0 y 1. El valor 1 indica una linealidad absoluta, y el 0 indica una relación no lineal. Incluso valores < 0,9 indican
una escasa linealidad y por lo tanto una medición defectuosa. En la impresión detallada es posible controlar
estos resultados. Para mejorar la linealidad, se utilizarán en el cálculo de la regresión lineal sólo los tres
mejores deltas adyacentes. Por eso es necesario programar al menos cinco deltas al crear un método nuevo.
Sin embargo de no lograrse una mejora considerando sólo tres deltas, serán utilizados todos los deltas en el
cálculo.
En la práctica las pruebas lineales muestran valores de R^2 cercanos al 1. En el ejemplo para el Procedimiento
de cálculo 11 (CIN/F/BR) son permitidos valores de R^2 ≥ 0,998. Valores de R^2 menores a este último pueden
ser causados por ejemplo por variaciones de temperatura, impurezas, reactivos en mal estado, tiempo de
retraso inconveniente, entre otros.
Para mejor supervisión de la linealidad, la cantidad de Deltas (deltas o Δt) escogida debe ser superior a la
especificada para los procedimientos manuales de medición. Por ejemplo el clásico test de tres minutos con
tres deltas de 60 s puede ser reemplazado por 15 deltas de 12 s.
Al programar un nuevo método basado en PC 11 o en PC 12 con el editor de métodos (ver capítulo 6 - EDITOR
DE METODOS, Fig. 6.5), es posible establecer límites inferior y superior para el resultado de la medición
ingresando valores en los parámetros MAX. VALOR y MIN. VALOR. Si el valor de la medición supera el valor
ingresado en MAX. VALOR el mensaje RANGO MAX. será mostrado. En caso que el valor de la medición sea
inferior al límite definido en MIN. VALOR el mensaje RANGO MIN. será mostrado. Además es posible definir un
valor minimo para R^2 mediante el parámetro MIN R^2, si el valor de R^2 obtenido en la medición es inferior al
valor ingresado en MIN. R^2 el mensaje NON-LINEAR será mostrado.
Para obtener resultados positivos al realizar tests con Absorbancia decreciente (ver Fig. 5.1.7.1), debe ser
ingresado un factor negativo. Sólo al ingresar MAX. VALOR y si el signo del resultado de la medición no
coincide con el signo del valor ingresado en MAX. VALOR será mostrado el mensaje RANGO +/-.
MAX. VALOR, MIN. VALOR y MIN. R^2 son desactivados al ingresar el valor cero.
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