9.2 Principios de funcionamiento
Se producen reacciones químicas entre los soportes sólidos reactivos, el diluyente
contenido en los rotores reactivos y la muestra añadida. Estas reacciones producen
cromóforos, que el VETSCAN VS2 Analizador Químico mide por fotometría. A con-
tinuación, el microprocesador calcula la concentración de los analitos.
Los sistemas ópticos de medida incluyen una lámpara estroboscópica de xenón, un
sistema de selección de longitud de onda y un detector para varias longitudes de
onda. La luz de la lámpara incide sobre un espejo, donde se refleja a cada cubeta.
Parte de la luz es absorbida por el contenido de la cubeta y el resto pasa por dos
aberturas, para después ser colimada en una lente. La luz colimada se divide median-
te divisores de haz y filtros de interferencia a longitudes de onda predeterminadas
(340, 405, 467, 500, 515, 550, 600, 630 y 850 nm), cada una de las cuales se mide
posteriormente en fotodiodos.
Las reacciones químicas utilizadas en las pruebas están diseñadas para producir
cromóforos que absorben la luz a longitudes de onda conocidas. El fotómetro mide
la luz que se trasmite a través de cada cubeta que contiene un cromóforo (la cubeta
de reacción). Esta luz transmitida, tras la corrección de la variabilidad de destello a
destello y de compensación electrónica, es inversamente proporcional a la concen-
tración de analito en la muestra. Las mediciones de transmitancia se convierten en
absorbancia aplicando la siguiente fórmula: absorbancia = log (transmitancia).
Para eliminar los errores del sistema y los factores que pueden interferir con el cálculo
de los resultados de la muestra, se mide la intensidad de la luz en cuatro lugares del
rotor reactivo: la cubeta específica del método que contiene el reactivo de la prueba, la
muestra y el diluyente; la cubeta de referencia de la muestra, que contiene el reactivo
de muestra de referencia, la muestra y el diluyente (utilizados en las reacciones de
criterio de valoración, explicadas más abajo); la cubeta abierta, que permite el paso
de la luz a su través; y la cubeta oscura, que bloquea el paso de la luz.
La luz que atraviesa la cubeta de reacción se mide en la longitud de onda absorbida
por el cromóforo (I
) y en la no absorbida por él (I
). La relación entre estas dos
λ1RC
λ2RC
medidas corrige la calidad óptica de la cubeta y la variabilidad de destello a destello
de la fuente de luz. La intensidad de la luz que se trasmite a través de la cubeta abierta
(I
, I
) se mide a las dos mismas longitudes de onda que la luz transmitida a través
λ1OC
λ2OC
de la cubeta de reacción. Se aplica una corrección de compensación electrónica en
las dos mismas longitudes de onda, midiendo la señal residual detectada cuando la
cubeta oscura se encuentra en la trayectoria óptica (I
, I
).
λ10
λ20
Se utiliza la siguiente ecuación para calcular la absorbancia:
100
VETSCAN VS2