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Toma, manipulación y almacenamiento de las muestras
Utilice preferentemente muestras de suero recién extraídas. La extracción de sangre debe
seguir los requerimientos de protocolo de su país.
No utilice muestras ictéricas, lipémicas, hemolizadas o contaminadas por bacterias. Los
sueros con partículas deben ser purificados por centrifugación a baja velocidad (<1000 x g).
Las muestras de sangre deben ser recogidas en tubos limpios, secos y vacíos.
Tras la separación, las muestras de plasma han de utilizarse durante las primeras 8 horas y
conservarse herméticamente cerradas a 2-8ºC/35-46ºF hasta 48 horas o congeladas a
-20ºC/-4ºF durante periodos más prolongados.
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Procedimiento del ensayo
7.1 Preparativos antes de dispensar
Diluya los reactivos concentrados:
Diluya el tampón de muestra concentrado a 1:5 con agua destilada (p.e. 20 ml en 80 ml)
Diluya el tampón de lavado concentrado a 1:50 con agua destilada (p.e. 20 ml en 980 ml).
A fin de evitar errores, es aconsejable marcar las tapas de los distintos calibradores.
Muestras:
Diluya las muestras de suero a 1:101 con tampón de muestra (1x)
p.e. 1000 µl tampón de muestra (1x) + 10 µl suero. Mezcle bien la dilución.
Lavado:
Prepare 20 ml de tampón de lavado diluido (1x) para 8 pocillos o 200 ml para 96 pocillos p.e.
4 ml de concentrado en 196 ml de agua destilada.
Lavado automático:
Tenga en cuenta los volúmenes de exceso requeridos para purgar el instrumento y el
volumen muerto en el dispensador del aparato.
Lavado manual:
Descarte el líquido de los pocillos invertiendo la placa. Golpee vigorosamente el marco con
los micropocillos sobre papel absorbente limpio manteniendo la placa invertida. Dispense
300 µl de tampón de lavado diluido dentro de cada pocillo y espere 20 segundos. Repita el
procedimiento entero dos veces más.
Microplacas:
Calcule el número de pocillos necesarios para el ensayo. Saque los pocillos no utlizados del
marco, póngalos de nuevo en la bolsa de plástico suministrada junto con el desecante y
séllela bien (2-8°C/35-46°F).
Product Ref.
3154
Product Desc.
Histone-H3
Manual Rev. No.
003 : 2015-11-20
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