FUNCIONAMIENTO
Introducción
Su medidor de densidad celular es un instrumento pequeño y fácil de usar que está dedicado a
la medición de la densidad de células en suspensión a 600 nm. Es adecuado para medir las
velocidades de crecimiento de todos los tipos de células, incluidas las de E.coli y levaduras, y
se ha diseñado para producir lecturas comparables con las de otros espectrofotómetros. Para
usar con otros tipos de células, se deben graficar concentraciones conocidas / recuentos
celulares (con réplicas para calibrar los límites de error) en función de la densidad óptica
medida a 600 nm (OD600), para construir de este modo una curva de calibración. La
conglomeración de células también afectará a las lecturas, por lo que el medio en el que se
encuentran suspendidas aquéllas tendrá también un efecto. El instrumento se puede usar en
armarios de incubación y bajo condiciones anaeróbicas.
El grado de crecimiento de un cultivo bacteriano necesita monitorizarse para asegurar que se
cosechen las células en el punto óptimo de mayor densidad de células vivas. La curva de
crecimiento se presenta a continuación.
Las células se deben cosechar hacia el final de la fase logarítmica. La densidad óptica de la
muestra indica cuando se haya alcanzado este punto. Este valor varía en función de las
células que se están cultivando.
Debido a que las muestras bacterianas son turbias, más que absorber la luz, principalmente la
dispersan. Esto significa que la lectura de hecho obtenida depende en gran parte del área
colectora del detector situado después de la muestra, y de la geometría óptica del sistema.
Como estas características varían según la marca y el modelo del instrumento, es de esperarse
que haya diferencias en las lecturas entre los distintos tipos de instrumentos.
Este instrumento está dedicado a la medición a 600 nm y se ha diseñado de modo de
garantizar que los resultados que se obtengan usándolo sean comparables con los de la
mayoría de otros espectrofotómetros. Las lecturas obtenidas a 595 nm sólo diferirán
ligeramente y dichas diferencias son, por lo general, insignificantes.
Para obtener la medición se usa una fuente LED de 600 nm en combinación con una fibra
óptica. El instrumento se puede conectar por vía de un cable serial a una impresora en serie
para la producción de material impreso, o bien, a un PC para la descarga de resultados a una
hoja electrónica de cálculos.
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5061-023SP REV 3.2
Measuring Cell Density
No.
cells
Log Phase
Lag
WPA CO 8000, Español
Stationary
Decline
time
2