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Programas PCR
Touchdown
Temperatura de
Introduzca la temperatura de desnaturalización (en el campo Temperatura de
desnaturalización
desnaturalización (Denaturation Temperature) ) y la duración de la
y tiempo de
desnaturalización (en el campo Mantener durante (Hold For) que hay al lado)
mantenimiento
que van a utilizarse para el ciclado touchdown.
(Denaturation
Temperature and
Hold Time)
Temperatura
Introduzca la temperatura máxima de hibridación. El primer ciclo del
máxima de
programa PCR utilizará esta temperatura de hibridación.
hibridación (Max
Annealing
Temperature)
Temperatura
Introduzca la temperatura mínima de hibridación. El último ciclo del
mínima de
programa PCR utilizará esta temperatura de hibridación.
hibridación (Min
Annealing
Temperature)
La diferencia entre las temperaturas máxima y mínima de hibridación es normalmente de
NOTA
entre 5°C y 10°C comenzando con una temperatura máxima que está 2°C por encima de la
temperatura de fusión del cebador más elevada (T
de 60°C y la T
temperatura mínima a unos 52°C.
Mantener
Introduzca la duración del paso de hibridación.
durante (Hold
For)
Temperatura de
Introduzca la temperatura de extensión (en el campo Temperatura de extensión
extensión y
(Elongation Temperature)) y la duración de la extensión (en el campo Mantener
tiempo de
durante (Hold For) que hay al lado) para el ciclado touchdown.
mantenimiento
(Elongation
Temperature and
Hold Time)
Ciclos (Cycles)
Introduzca el número de ciclos del paso Touchdown.
50
del cebador 2 es de 54°C, ajuste la temperatura máxima a 62°C y la
m
Guía de configuración y uso de Agilent SureCycler 8800
). Por ejemplo, si la T
m
m
del cebador 1 es