Ficoeritrina de algas azul-verdosas
Este procedimiento calibra los μg/l de BGA RFU o BGA. Si el usuario tiene ambas unidades seleccionadas, este procedimiento se debe
realizar dos veces, una vez para cada unidad, para calibrar el parámetro por completo.
Para la calibración de 2 puntos, una de las soluciones estándar debe ser agua limpia (0 μg/l), y esta solución se debe calibrar primero.
La otra solución estándar se debe encontrar en el rango de un contenido de BGA-PE estimado en el sitio. Se pueden utilizar dos tipos
generales de soluciones estándar: (a) suspensiones de fitoplancton de contenido BGA-PE conocido y (b) soluciones de colorante cuya
fluorescencia se puede correlacionar con aquella de las BGA-PE. El usuario es responsable de determinar el contenido de BGA-PE de
las suspensiones de algas mediante el empleo de técnicas de conteo de células estándar.
Para la opción (b), recomendamos utilizar la solución colorante de 25 μg/l de rodamina WT
(para obtener instrucciones detalladas,
consulte el final de esta
sección). La solución se utiliza en los siguientes pasos de calibración.
μg/l – 1 o 2 puntos
Este procedimiento reinicia su sensor de fluorescencia a cero y utiliza la sensibilidad predeterminada para el cálculo de BGA con
contenido de ficoeritrina en μg/l, lo cual permite realizar mediciones rápidas y simples de fluorescencia que son solo semicuantitativas
con respecto a las BGA-PE. Sin embargo, las lecturas reflejarán cambios en las BGA-PE de sitio a sitio o con el paso del tiempo en un
único sitio.
Vierta la cantidad adecuada de agua limpia destilada o desionizada dentro del recipiente de calibración. Sumerja el extremo del sensor
de la sonda en agua. En el menú Calibrate (Calibrar), seleccione BGA-PE/Chlor (BGA-PE/Clorof.) y luego BGA μg/L (BGA μg/l). Seleccione
calibración de 1 o 2 puntos. Cuando use rodamina WT, ingrese 0 para el primer valor estándar y 126 para el segundo valor estándar.
Haga clic en Start Calibration (Iniciar calibración). Observe las lecturas debajo de los puntos de datos Current (Actuales) y Pending
(Pendientes). Mientras se estabiliza, haga clic en el botón Wipe Sensors (Limpiar sensores) para activar el limpiador y eliminar todas
las burbujas. Cuando los datos estén Stable (Estables) (o no muestren cambios significativos durante aproximadamente 40 segundos),
haga clic en Apply (Aplicar) para aceptar este punto de calibración.
Luego, coloque los sensores en solución estándar de rodamina WT. Haga clic en la opción Proceed (Continuar) que aparece en la ventana
emergente. Observe las lecturas debajo de los puntos de datos Current (Actuales) y Pending (Pendientes). Mientras se estabiliza, haga
clic en el botón Wipe Sensors (Limpiar sensores) para activar el limpiador y eliminar todas las burbujas. Cuando los datos estén Stable
(Estables) (o no muestren cambios significativos durante aproximadamente 40 segundos), haga clic en Apply (Aplicar) para aceptar este
punto de calibración.
Haga clic en Complete (Completo). Observe la pantalla Calibration Summary (Resumen de calibración) y el QC score (Puntaje de control
de calidad). Haga clic en Exit (Salir) para regresar al menú de calibración del sensor y luego en las flechas hacia atrás para regresar al
menú principal Calibrate (Calibrar). Enjuague la sonda en agua corriente o purificada y séquela.
RFU – 1 o 2 puntos
RFU es un resultado en porcentaje a escala completa; es el resultado de la fluorescencia relativa del 0 al 100 %. Este procedimiento de
calibración se recomienda si utiliza también muestras al azar para lecturas de algas in vivo posteriores a la calibración.
Vierta la cantidad adecuada de agua limpia destilada o desionizada dentro del recipiente de calibración. Sumerja el extremo del sensor
de la sonda en agua. En el menú Calibrate (Calibrar), seleccione BGA-PE/Chlor (BGA-PE/Clorof.) y luego BGA RFU. Seleccione calibración
de 1 o 2 puntos. Cuando use rodamina WT, ingrese 0 para el primer valor estándar y 45 para el segundo valor estándar.
Haga clic en Start Calibration (Iniciar calibración). Observe las lecturas debajo de los puntos de datos Current (Actuales) y Pending
(Pendientes). Mientras se estabiliza, haga clic en el botón Wipe Sensors (Limpiar sensores) para activar el limpiador y eliminar todas
las burbujas. Cuando los datos estén Stable (Estables) (o no muestren cambios significativos durante aproximadamente 40 segundos),
haga clic en Apply (Aplicar) para aceptar este punto de calibración.
Luego, coloque los sensores en solución estándar de rodamina WT. Haga clic en la opción Proceed (Continuar) que aparece en la ventana
emergente. Observe las lecturas debajo de los puntos de datos Current (Actuales) y Pending (Pendientes). Mientras se estabiliza, haga
clic en el botón Wipe Sensors (Limpiar sensores) para activar el limpiador y eliminar todas las burbujas. Cuando los datos estén Stable
(Estables) (o no muestren cambios significativos durante aproximadamente 40 segundos), haga clic en Apply (Aplicar) para aceptar este
punto de calibración.
Haga clic en Complete (Completo). Observe la pantalla Calibration Summary (Resumen de calibración) y el QC score (Puntaje de control
de calidad). Haga clic en Exit (Salir) para regresar al menú de calibración del sensor y luego en las flechas hacia atrás para regresar al
menú principal Calibrate (Calibrar). Enjuague la sonda en agua corriente o purificada y séquela.
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