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cytiva SE 250 Mighty Small II Instrucciones De Funcionamiento página 37

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Descripción del
error
Baja resolución de
bandas
El azul de bromo-
fenol no se intensi-
fica en una zona
concentrada del gel
de apilamiento
SE 250/260 Mighty Small II Instrucciones de funcionamiento 29281629 AB
Medida correctiva
Utilice solo reactivos de la máxima calidad.
Realice la separación con un ajuste más bajo de corriente o
tensión.
Dialice o desalinice la muestra.
Reduzca el volumen o la concentración de la muestra.
Utilice exclusivamente urea recién desionizada.
Mejore la disociación de subunidades calentando la muestra
en tampón de muestra con SDS durante 1–2 minutos a
100 °C.
Agregue más mercaptoetanol o ditiotreitol; compruebe el
tratamiento de la muestra.
Utilice solo geles recién preparados.
Compruebe los valores de pH de las soluciones de gel de
separación y apilamiento. No vuelva a titular los tampones.
Preparación de la muestra:
• Caliente muestras durante no más de 1–2 minutos a
100 °C. Conservar en hielo después del calentamiento.
• Guarde la muestra en hielo antes de que se desnatura-
lice.
• Agregue inhibidores de proteasa si es necesario para
evitar la degradación proteolítica de la muestra.
• Almacene congeladas muestras parciales para evitar
congelar-descongelar repetidamente. (Conserve a una
temperatura de -40 % - -80 %.)
Vierta un gel de apilamiento más alto. (Para unos resultados
óptimos, permita una altura del gel de apilamiento que sea
2,5 veces la altura de la muestra en el pocillo.)
Elimine las soluciones de acrilamida caducadas y utilice solo
acrilamida de máxima calidad.
Cuando prepare muestras, no utilice soluciones con alta
concentración de sodio o potasio.
7 Solución de problemas
37

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Se 260 mighty small ii