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Modalidades de una y dos longitudes de onda
El lector capta información en dos modalidades diferentes:
•
Simple, utilizando una sola longitud de onda de prueba.
•
Doble, utilizando una longitud de onda de referencia y una longitud de
onda de prueba.
La modalidad de longitud de onda simple es suficiente para casi todas las
aplicaciones. La modalidad de longitud de onda doble puede utilizarse cuando es
conveniente reducir los errores ocasionados por suciedad y rayadas en el fondo de
los pocillos. Las longitudes de onda de prueba y de referencia elegidas para la
modalidad de doble longitud de onda dependerán del sistema enzimático / de
sustratos que se esté probando. Sin embargo, normalmente deberán observarse
las normas siguientes:
1.
La longitud de onda de prueba (λt) deberá ser igual o aproximarse a
la absorbancia máxima del producto de la reacción.
2.
La longitud de onda de referencia (λr) deberá quedar fuera de la
banda de absorbancia del sistema, aunque no demasiado alejada.
Para minimizar el efecto de los errores sistemáticos, el lector resta la absorbancia
presente en la longitud de onda de referencia (λr) de la absorbancia existente en la
longitud de onda de prueba (λt).
Si una prueba exige una precisión determinada, deberán especificarse filtros de
prueba y referencia que tengan la misma longitud de onda. El lector calculará el
promedio de las densidades ópticas producidas con la utilización de cada filtro,
facilitando así un resultado más preciso.
405 nm
Figura 17. Selección de doble longitud de onda
24
λ
t
LONGITUD DE ONDA DEL FILTRO
Sistema DSX™. Manual de instrucciones
λ
r
690 nm
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