Preparación De Hp3 Para Experimentos Indexados; Preparación De Rmr - Illumina HiSeq 2000 Manual De Uso

Guía del sistema HiSeq 2000
Descongelación de los reactivos de indexado
1 Extraiga los reactivos siguientes, almacenados a una temperatura de entre −25 °C y −15 °C:
Para todos los experimentos indexados: HP3, HP14 o HP8, y HT2
u
Para los experimentos de doble índice en una celda de flujo de lectura individual: HP9
u
Para los experimentos de doble índice en una celda de flujo "paired-end": RMR
u
2 Descongele los reactivos en un vaso de precipitados lleno de agua desionizada a temperatura ambiente
durante aproximadamente 20 minutos.
Preparación de HT2
1 Invierta para mezclar.
2 Centrifugue a 1000 r/min durante 1 minuto.
3 Déjelo reposar a temperatura ambiente.
Preparación de HP3 para experimentos indexados
1 Invierta para mezclar y, después, realice un centrifugado.
2 Combine los siguientes volúmenes de HP3 y PW1:
Para experimentos de un solo índice: transfiera 3325 µl de PW1 a un tubo cónico de 15 ml vacío y,
u
después, añada 175 µl de HP3.
Para experimentos de doble índice: transfiera 3800 µl de PW1 a un tubo cónico de 15 ml vacío y,
u
después, añada 200 µl de HP3.
3 Invierta para mezclar.
4 Centrifugue a 1000 r/min durante 1 minuto.
5 Déjelo reposar a temperatura ambiente.
Preparación de HP8 o HP14
1 Invierta para mezclar.
2 Centrifugue a 1000 r/min durante 1 minuto.
3 Déjelo reposar a temperatura ambiente.
Preparación de RMR
1 Invierta para mezclar.
2 Centrifugue a 1000 r/min durante 1 minuto. No lo agite en un mezclador vorticial.
3 Déjela reposar en hielo.
Preparación de HP9
1 Invierta para mezclar.
2 Centrifugue brevemente para recoger las gotas.
3 Déjelo reposar a temperatura ambiente.
N.º de documento 15011190 v02 ESP
Para uso exclusivo en investigación. Prohibido su uso en procedimientos de diagnóstico.
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