División De Kits Sbs; División De Un Kit De 250 Ciclos; División De Un Kit De 200 Ciclos - Illumina HiSeq 2000 Manual De Uso

Guía del sistema HiSeq 2000
2 Tras cargar la celda de flujo de secuenciación para el experimento nuevo, cierre la puerta del
compartimento.
3 Seleccione Start (Iniciar) para comenzar el nuevo experimento de secuenciación.
División de kits SBS
Para realizar un experimento "paired-end" de menos de 125 ciclos por lectura, divida un kit HiSeq v4 de 250
ciclos en dos conjuntos de reactivos. Un conjunto proporciona reactivos para un experimento de 126 ciclos
con doble índice y un cebado. Para un experimento de menos de 67 ciclos, utilice un kit de 50 ciclos.
La división de un kit TruSeq v3 de 200 ciclos proporciona suficientes reactivos para realizar hasta 101 ciclos
con un cebado. Para un experimento de menos de 101 ciclos, utilice un kit de 50 ciclos.
División de un kit de 250 ciclos
1 Descongele los reactivos del kit de SBS de HiSeq v4 (250 ciclos). Consulte
reactivos SBS en la página
2 Etiquete siete botellas de 250 ml con el número de posición y el nombre del reactivo de la siguiente
forma:
N.º 1 IRM
u
N.º 3 USM
u
N.º 4 SB1
u
N.º 5 SB2
u
N.º 6 SB2
u
N.º 7 CRM
u
N.º 8 SB3
u
3 Añada el siguiente volumen de cada reactivo a la botella de 250 ml que corresponda para obtener un
segundo conjunto de reactivos. Prepare CRM en último lugar y, a continuación, cambie de guantes.
Número
1
3
4
5
6
7
8
4 Utilice los dos conjuntos de reactivos para dos experimentos simultáneos o almacene un conjunto a las
siguientes temperaturas:
Almacene IRM, USM y CRM a una temperatura de entre –25 °C y –15 °C.
u
Almacene SB1, SB2 y SB3 a una temperatura de entre 15 °C y 30 °C.
u
División de un kit de 200 ciclos
1 Descongele los reactivos del kit de SBS de TruSeq v3 (200 ciclos). Consulte
reactivos SBS en la página
N.º de documento 15011190 v02 ESP
Para uso exclusivo en investigación. Prohibido su uso en procedimientos de diagnóstico.
14.
Nombre del reactivo
IRM
USM
SB1
SB2 (para la posición n.º 5)
SB2 (para la posición n.º 6)
CRM
SB3
31.
Descongelación de los
Volumen
72 ml
82 ml
100 ml
62 ml
62 ml
72 ml
110 ml
Descongelación de los
60