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Recuerde cambiar la punta de la pipeta cada vez que
muestree un tipo diferente de líquido.
Aspirado de Líquidos de Alta Densidad
Al pipetear líquidos de mayor viscosidad o menor tensión
superficial que el agua (por ejemplo, sueros o disolventes
orgánicos), se forma una película de líquido en la pared
interior de la punta de la pipeta. Esta película puede
generar un error. Debido a que la película permanecerá
relativamente constante en las operaciones de pipeteo
sucesivas realizadas con la misma punta, este error puede
eliminarse al formarse la película antes de transferir
la primera muestra. Esto se realiza aspirando una muestra
y dispensándola de nuevo en el mismo recipiente. En este
momento, al haberse formado la película, cualquiera
de las siguientes muestras tendrá una mejor precisión
y repetibilidad.
Esta operación de enjuague previo debe repetirse de nuevo
cuando se modifique el volumen a aspirar o cuando
se utilice una nueva punta de pipeta.
NOTA: Normalmente el grado de error causado por líquidos
pesados o viscosos es insignificante si el pipeteo se realiza
despacio y con cuidado. Es muy importante permitir a los
líquidos algo de tiempo para que reaccionen a los cambios
de presión manteniendo la punta de la pipeta en su posición
durante al menos 2 segundos después del aspirado y el
proceso de soplado.
Si en algún caso extremo, el método descrito de operación
no proporciona valores precisos, vuelva a calibrar la pipeta
de acuerdo con lo indicado en la Sección 9.
Después del calibrado, se recomienda llevar un registro del
recalibrado y del tamaño de la corrección introducida para
facilitar la calibrado inversa del líquido estándar.
9. Comprobación de los Parámetros de Precisión
del Pipeteo y Recalibrado de la Pipeta
Las pipetas son calibradas de fábrica utilizando el método
gravimétrico con puntas de pipeta Axygen® y agua
destilada, de acuerdo con las directrices ISO 8655 para el
volumen máximo (nominal) de líquido extraído por lapipeta
y para el 10% del volumen máximo según los valores dados
(Sección 5).
El diseño de las pipetas permite su recalibrado y adaptación
a otras técnicas de pipeteo o propiedades de los líquidos
(es decir, temperatura, densidad y viscosidad).
10 – Pipetas Axygen Axypet Pro
Se recomienda realizar verificaciones periódicas de la
operación de la pipeta con una periodicidad mínima
anual, el período de operación correcta de una pipeta sin
verificar depende del tipo de carga de trabajo (líquidos
recogidos y de las restantes condiciones (intensidad
de la carga y esterilización en el autoclave o reemplazo
de componentes) en las que se utiliza la pipeta.
Si durante la operación de la pipeta se observa que el error
de precisión (la diferencia entre el volumen real aspirado
y el volumen preestablecido) excede el valor permisible
mostrado en la tabla en la sección 5, deberá llevarse a cabo
el procedimiento de recalibrado de la pipeta.
La recalibrado de la pipeta consiste en establecer en
el contador el valor del volumen de líquido obtenido
en el pesaje. El recalibrado de la pipeta se realiza solo por
un volumen de líquido extraído por la pipeta. El volumen
recomendado para el recalibrado es el 10% del valor
máximo (nominal).
Condiciones para Verificar los Parámetros de Precisión del
Pipeteo
La precisión del pipeteo está influenciada por factores
tales como: las puntas utilizadas, las características del
líquido pipeteado (densidad, viscosidad) o las condiciones
de operación (temperatura ambiente, presión).
Para poder determinar el error en la precisión de la pipeta,
deben cumplirse las siguientes condiciones:
• La temperatura ambiente y la temperatura de la pipeta,
las puntas de la pipeta y el líquido deben estar dentro del
rango de 20 °C a 25 °C y estabilizarse durante el pesaje
en ± 0.5 °C.
• Las mediciones deben realizarse utilizando agua
destilada.
• La sensibilidad del equilibrio debe ser aceptable para
el volumen "V" que se va a medir:
Volumen Comprobado
(µL)
0,1≤V≤ 10
10≤V≤100
V>100
• Al calcular el volumen de líquido aspirado por la pipeta se
deben tener en cuenta los valores del factor de conversión
Z [μL/mg] del agua destilada o de un líquido de densidad
comparable. Los valores de muestra de este factor de
conversión se muestran en la siguiente tabla:
Sensibilidad de Equilibrio
(mg)
0,001
0,01
0,1
MANUAL DE INSTRUCCIONES – 11
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