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Problemas con la Calidad del DNA
Problema
Causa
Lisis Incompleta
Baja calidad del
Bajo
material Inicial
rendimiento de
DNA
Cantidad insuficiente
de perlas magneticas
adicionadas
Puntas de pipetas
obstruídas pueden
resultar en pérdidas
de DNA
Perlas Magnéticas
manipuladas o
almacenadas
No hay
inapropiadamente
recuperación
de DNA
Perlas magnéticas
El eluato que
presentes en el
contien el
eluato
DNA está
DNA contaminado
descolorido
con hemo
Burbujas que se
forman durante las
etapas de mezclado
DNA
DNA repetidamente
esquilado o
congelado y
degradado
descongelado
DNA contaminado
con Dnasas
Solución
Disminución de la cantidad de material inicial
Asegúrese de agregar Proteinasa K durante la lísis si esta
incluída en el protocolo
Asegúrese que la muestra esta sumergida en el buffer de lisis
Procese previamente las muestras difíciles en nuestro sistemas Fast
Prep de preparación de muestras
Asegúrese de realizar el proceso de extracción ni bien recibido el
material o almacénelo a la temperatura apropiada. El rendimiento y
calidad de DNA aislado depende de la calidad del material extraído
Durante el embarque alguna solución de perlas magneticas se podría
adherir a la lámina de aluminio que cubre los cartuchos. Golpee
ligeramente el cartucho en la mesa de trabajo para depositar la
solución de perlas en el fondo del pocillo
Asegúrese que el lisado no contenga partículas de material que
pueda obstruir la punta del pipeta. Si fuera necesario centrifugue la
muestra previamente a introducirle al MPure -12
Almacene los cartuchos que contienen perlas magnéticas a
temperatura ambiente
No coloque en freezer los cartuchos ya que las perlas podrían
dañarse irremediablemente
Asegúrese que las perlas magnéticas estén siempre en solución,
nunca secas ya que las perlas secas no son funcionales
Remueva las perlas usando un separador magnético o centrifugue la
muestra en una microcentrifuga 1 minuto a máxima velocidad.
Minimize la cantidad de sangre o muestras ensangrentadas (<20ul
de mancha de sangre para muestras forenses)
Para prevenir la formación de burbujas durante las etapas de
mezclado ajustar el volumen de muestra a la cantidad recomendada
por protocolo y manual
Alicuotar el DNA a purificar y almacenar las mismas a 4°C ( período
corto) o a -20°C (período largo). Evite freezar y descongelar
repetidas veces
Mantenga un ambiente estéril mientras trabaja(por ej. Use guantes y
reactivos libres de Dnasa)
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