Sustitución Del Medio De Cultivo - cytiva WAVE Bioreactor20/50 Instrucciones De Funcionamiento

Una secuencia de inóculo típica es:
Paso
1
2
3
4
5
En esta secuencia, solamente se hizo una transferencia al ir desde 200 mL a 10 L de
cultivo. Esto ahorra tiempo y reduce el riesgo de contaminación. Este esquema
también puede usarse para aumentar el inóculo para biorreactores convencionales
más grandes.
Sustitución del medio de cultivo
Para obtener instrucciones sobre cómo monitorizar y configurar las condiciones de
funcionamiento para la configuración actual del sistema, consulte las partes rele-
vantes de
consultar la descripción de los componentes de la bolsa de cultivo en la
Biorreactor Cellbag, en la página
Nota:
Paso
1
2
3
4
WAVE Bioreactor 20/50 y WAVEPOD II Instrucciones de funcionamiento 29005707 AD
Acción
Comience con 200 mL de medio en un Cellbag de 2 L. Agregue inóculo.
Cuando las células alcancen una concentración de 2 × 10
células/mL, agregue 300 mL de medio a la Cellbag.
Cuando las células alcancen nuevamente una concentración de 2 × 10
6
10 células/mL, agregue más medio para llevar el volumen a 1 litro.
Cuando las células alcancen una concentración de 2 × 10
fiéralas a una Cellbag de 20 L que contenga 2 litros de medio, usando un
fusor de tubo.
Cuando las células en un Cellbag de 20 L alcancen nuevamente una concen-
6
tración de 2 × 10 células/mL, lleve el volumen a 10 litros y continúe el cultivo
con el volumen completo.
Capítulo 5 Sistema de control de WAVE Bioreactor, en la página
Para evitar el posible agotamiento del oxígeno, el cambio del medio de
cultivo debe realizarse en menos de una hora.
Acción
Detenga la oscilación y la aireación, y afloje las abrazaderas de los filtros de
entrada y de salida.
Retire el soporte de la bandeja para unidad de oscilación del instrumento
WAVE Bioreactor y colóquelo en posición vertical apoyado en un soporte.
Espere entre 10 y 15 minutos a que se asienten las partículas (incluidas
células y microportadores, si los hay).
Conecte los tubos a la línea de recolección del biorreactor Cellbag. El otro
extremo de este tubo debe conectarse a un recipiente de recolección estéril.
Con una bomba peristáltica o flujo de gravedad, retire la cantidad deseada
de líquido de cultivo sobrenadante manipulando manualmente la pared
flexible del biorreactor Cellbag.
31.
8 Funcionamiento
8.9 Opciones de cultivo
6 6
a 3 × 10
6
a 3 ×
6
células/mL, trans-
72. Puede
Sección 3.3
213