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Solución de problemas
Manuales relacionados para Qiagen PyroMark Q24
Resumen de contenidos para Qiagen PyroMark Q24
- Página 1 Marzo de 2015 Manual uso del PyroMark ® Control Oligo Versión 1 Para la comprobación de la instalación del sistema PyroMark Q24 MDx. Para uso diagnóstico in vitro 979303 1057421ES QIAGEN GmbH, QIAGEN Strasse 1, 40724 Hilden, ALEMANIA 1057421ES Sample & Assay Technologies...
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Página 2: Qiagen: Tecnologías De Preparación De Muestras Y Ensayos De Biología Molecular
QIAGEN: Tecnologías de preparación de muestras y ensayos de biología molecular QIAGEN es el proveedor líder de tecnologías innovadoras para la preparación de muestras y ensayos de biología molecular, que permiten el aislamiento y la detección del contenido de cualquier muestra biológica. Nuestros productos y servicios de vanguardia y máxima calidad garantizan el éxito, desde la muestra... -
Página 3: Tabla De Contenido
Señal de fondo Diferencia en las alturas de los picos con y sin preparación de las muestras 41 Apéndice A: Preparación de la estación de vacío PyroMark Q24 MDx 43 Apéndice B: Vaciado del recipiente de desechos y de los recipientes Bibliografía... -
Página 4: Contenido Del Kit
Producto sanitario para diagnóstico in vitro Número de referencia Número de lote Número de material Componentes Contiene Número Hidróxido de sodio Número mundial de artículo comercial Limitación de temperatura Fabricante legal Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 03/2015... -
Página 5: Conservación
Nota importante Conservación El PyroMark Q24 Control Oligo debe conservarse de –30 °C a –15 °C tras su recepción. Deben evitarse ciclos repetidos de descongelación y congelación (> 5 al año). El producto es estable hasta la fecha de caducidad si se conserva en estas condiciones. -
Página 6: Control De Calidad
Control de calidad En cumplimiento del sistema de gestión de calidad con certificación ISO de QIAGEN, cada lote de PyroMark Q24 Control Oligo se analiza en relación con especificaciones predeterminadas para garantizar la uniformidad de la calidad del producto. -
Página 7: Introducción
Principio y procedimiento El PyroMark Q24 Control Oligo contiene un oligonucleótido biotinilado que permite al usuario verificar que el PyroMark Q24 MDx y la estación de vacío PyroMark Q24 MDx funcionan correctamente. En condiciones definidas, el oligonucleótido firma una estructura de horquilla interna. - Página 8 MDx, siga el procedimiento “Protocolo: Verificación del funcionamiento del sistema PyroMark Q24 MDx”, página 15. El PyroMark Q24 Control Oligo se prepara utilizando la estación de vacío PyroMark Q24 MDx antes de su análisis en el PyroMark Q24 MDx. Resolución de problemas del sistema PyroMark Q24 MDx Para realizar una resolución de problemas de todo el sistema, siga el...
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Página 9: Equipo Y Reactivos Que Debe Suministrar El Usuario
Placa PyroMark Q24 (ref. 979301) † Cartucho PyroMark Q24 (ref. 979302) † † Estación de vacío PyroMark Q24 MDx (ref. 9001515 ó 9001517)* Reactivos PyroMark Gold Q24 (ref. 971802) † Tampón de unión PyroMark (ref. 979306) †... -
Página 10: Protocolo: Verificación Del Funcionamiento Del Pyromark Q24 Mdx
Este protocolo describe cómo utilizar el PyroMark Q24 Control Oligo únicamente para verificar el funcionamiento del PyroMark Q24 MDx. Para verificar el funcionamiento de todo el sistema PyroMark Q24 MDx, incluida la estación de vacío PyroMark Q24 MDx, consulte “Protocolo: Verificación del funcionamiento del sistema PyroMark Q24 MDx”, página 15. - Página 11 “Tools” (Herramientas) y, cuando aparezca el informe, haga clic en 9. Diluya el PyroMark Q24 Control Oligo hasta 0,04 µM tal como se muestra en la tabla 1. Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 06/2009...
- Página 12 Q24 Control Oligo con agua ultrapura antes de su uso. Consulte “Antes de comenzar”, página 10. 10. Agregue 25 µl del PyroMark Q24 Control Oligo diluido (0,04 µM) a cada pocillo de una placa PyroMark Q24. 11. Caliente la placa PyroMark Q24 con los PyroMark Q24 Oligos a 80 °C durante 2 min utilizando un bloque calefactor y el portaplacas...
- Página 13 29. Deseche la placa PyroMark Q24 y limpie el cartucho PyroMark Q24 (consulte el Manual de uso de los reactivos PyroMark Gold Q24). 30. Abra la serie analítica en el software PyroMark Q24 MDx y analice todos los pocillos. El patrón de picos de la serie analítica 1 debería tener un aspecto similar al mostrado en la figura 3.
- Página 14 1. Si falla la repetición de la serie 1, consulte nuestro Centro de Servicio Técnico en www.qiagen.com/Support o póngase en contacto telefónico con uno de los departamentos de Servicio Técnico de QIAGEN o con los distribuidores locales (consulte la contraportada o visite www.qiagen.com).
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Página 15: Protocolo: Verificación Del Funcionamiento Del Sistema Pyromark Q24
PyroMark Q24 MDx Este protocolo describe cómo utilizar el PyroMark Q24 Control Oligo para verificar la función del sistema PyroMark Q24 MDx, incluida la estación de vacío PyroMark Q24 MDx. Para verificar sólo la función del PyroMark Q24 MDx, consulte “Protocolo: Verificación del funcionamiento del PyroMark Q24 MDx”, página 10. - Página 16 PyroMark Q24 MDx”. 7. Guarde la configuración de serie analítica en una unidad de memoria USB (suministrada con el sistema PyroMark Q24 MDx). 8. Imprima una lista de los volúmenes necesarios de mezcla enzimática, mezcla de sustrato y nucleótidos y la configuración de la placa.
- Página 17 55 µl 1.430 µl * Proporciona una cantidad suficiente para las 24 muestras necesarias. 11. Diluya el PyroMark Q24 Control Oligo hasta 0,04 µM tal como se muestra en la tabla 3. Tabla 3. Dilución del PyroMark Q24 Control Oligo...
- Página 18 Asegúrese de que la placa tenga la misma orientación que durante la carga de las muestras. Figura 5. Colocación de la placa (o las tiras) de PCR y de la placa PyroMark Q24 en la estación de vacío PyroMark Q24 MDx. Las posiciones marcadas contienen etanol al 70% (1), solución desnaturalizante PyroMark (2), tampón de lavado PyroMark...
- Página 19 PyroMark Q24 MDx (consulte el Apéndice B, página 45). 30. Caliente la placa PyroMark Q24 con las muestras a 80 °C durante 2 min utilizando un bloque calefactor y el portaplacas PyroMark Q24 precalentado.
- Página 20 32. Cargue el cartucho PyroMark Q24 con los volúmenes apropiados de reactivos PyroMark Gold Q24, indicados en el informe “Pre Run Information” generado en el paso 8. El informe “Pre Run Information”, al que puede accederse desde el menú “Tools” en la configuración de la serie analítica (consulte la “Guía de usuario del software PyroMark Q24 MDx”), proporciona información sobre...
- Página 21 48. Deseche la placa PyroMark Q24 y limpie el cartucho PyroMark Q24 (consulte el Manual de uso de los reactivos PyroMark Gold Q24). 49. Abra la serie analítica en el software PyroMark Q24 MDx y analice todos los pocillos. El patrón de picos de la serie analítica 2 debería tener un aspecto similar al mostrado en la figura 7.
- Página 22 Centro de Servicio Técnico en www.qiagen.com/Support o póngase en contacto telefónico con uno de los departamentos de Servicio Técnico de QIAGEN o con los distribuidores locales (consulte la contraportada o visite www.qiagen.com). Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 03/2015...
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Página 23: Protocolo: Procedimiento Para La Resolución De Problemas
Q24 MDx o con el ensayo. Este protocolo describe cómo utilizar el kit del PyroMark Q24 Control Oligo para verificar el funcionamiento del sistema PyroMark Q24 MDx, comparando los resultados con y sin la estación de vacío PyroMark Q24 MDx. - Página 24 Recomendamos utilizar 16 pocillos: 8 pocillos para las muestras preparadas con la estación de vacío PyroMark Q24 MDx y 8 muestras agregadas directamente a la placa PyroMark Q24. Para agregar un ensayo a un pocillo, puede realizar uno de los procedimientos indicados a continuación:...
- Página 25 55 µl 495 µl * Proporciona una cantidad suficiente para las 8 muestras necesarias. 11. Diluya el PyroMark Q24 Control Oligo hasta 0,04 µM tal como se muestra en la tabla 5. Tabla 5. Dilución del PyroMark Q24 Control Oligo.
- Página 26 Asegúrese de que la placa tenga la misma orientación que durante la carga de las muestras. Figura 9. Colocación de la placa (o las tiras) de PCR y de la placa PyroMark Q24 en la estación de vacío PyroMark Q24 MDx. Las posiciones marcadas contienen etanol al 70% (1), solución desnaturalizante PyroMark (2), tampón de lavado PyroMark...
- Página 27 Figura 10. Ilustración de la herramienta de vacío elevada más allá de la vertical a 90°. 23. Mientras mantiene la herramienta sobre la placa PyroMark Q24, cierre el interruptor de vacío de la herramienta (Off). 24. Libere las microesferas en la placa que contiene 25 µl de tampón de annealing PyroMark agitando la herramienta de un lado a otro.
- Página 28 PyroMark Q24 MDx (consulte el Apéndice B, página 45). 30. Caliente la placa PyroMark Q24 con las muestras a 80 °C durante 2 min utilizando un bloque calefactor y el portaplacas PyroMark Q24 precalentado.
- Página 29 48. Deseche la placa PyroMark Q24 y limpie el cartucho PyroMark Q24 (consulte el Manual de uso de los reactivos PyroMark Gold Q24). 49. Abra la serie analítica en el software PyroMark Q24 MDx y analice todos los pocillos. El patrón de picos debería tener un aspecto similar al mostrado en la figura 11.
- Página 30 51. Evalúe la diferencia en las alturas de los picos con y sin preparación de las muestras. La reducción de la altura de los picos entre las muestras preparadas con la estación de vacío PyroMark Q24 MDx en comparación con el PyroMark Q24 Control Oligo agregado directamente a la placa PyroMark Q24 no debería ser superior al...
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Página 31: Guía De Resolución De Problemas
Diferencia en las alturas de los picos con y sin preparación de las muestras, página 41 Consulte el Manual de usuario del PyroMark Q24 para la resolución de problemas generales del instrumento. Valoración de la calidad Comentarios y sugerencias Advertencia del software por picos anchos La concentración del... - Página 32 PyroMark Q24. Si el problema persiste, forma de picos divididos) póngase en contacto con el Servicio Técnico de QIAGEN (encontrará la información de contacto en la contraportada o en www.qiagen.com). Comentarios y sugerencias Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 03/2015...
- Página 33 PyroMark Q24. Siga las PyroMark Q24 no está instrucciones de uso que se suministran con rellenado correctamente con los productos. reactivos o nucleótidos Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 06/2009...
- Página 34 Limpie el bloque calefactor y el sistema de PyroMark Q24 MDx lente y cable de fibra óptica conforme a las sin que se haya instrucciones provistas en el Manual de usuario del introducido una PyroMark Q24. placa Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 03/2015...
- Página 35 (seleccione una sección del pirograma con el botón primario del ratón). Advertencia relativa a la relación señal-ruido Diversas Consulte los puntos a) a k) del apartado “Picos pequeños o ausentes”, más arriba. Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 06/2009...
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Página 36: Resultados De Cuantificación
PyroMark Q24 y compruebe que funciona correctamente. f) Cartucho PyroMark Q24 Deseche el cartucho PyroMark Q24 dañado conforme a la normativa medioambiental federal, estatal y local para la eliminación de residuos de laboratorio. Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 03/2015... -
Página 37: Alturas De Picos Mononucleotídicos
10x suministrado se diluya primero hasta 1x con agua ultrapura. b) Secuencia para analizar u Compruebe que ha escrito la orden de dispensación secuencia correcta en la configuración del incorrectos ensayo. Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 06/2009... - Página 38 No hay suficiente mezcla Rellene el cartucho PyroMark Q24 enzimática o de sustrato conforme a las instrucciones descritas en el para todos los pocillos informe “Pre Run Information”. Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 03/2015...
- Página 39 Los tampones o los reactivos Siga las instrucciones que se se han diluido o conservado suministran con los reactivos. incorrectamente Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 06/2009...
- Página 40 PyroMark Q24 Control Oligo en el tampón de dilución tal como se describe en los protocolos. Asegúrese de que el tampón de dilución 10x suministrado se diluya primero hasta 1x con agua ultrapura. Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 03/2015...
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Página 41: Señal De Fondo
Técnico en www.qiagen.com/Support o póngase en contacto telefónico con uno de los departamentos de Servicio Técnico de QIAGEN o con los distribuidores locales (consulte la contraportada o visite www.qiagen.com). Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 06/2009... - Página 42 Asegúrese de que los tubos están vacío PyroMark Q24 MDx correctamente conectados y de que no hay fugas. Es posible que el filtro de desechos esté húmedo y que sea necesario sustituirlo. Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 03/2015...
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Página 43: Apéndice A: Preparación De La Estación De Vacío Pyromark Q24 Mdx
Apéndice A: Preparación de la estación de vacío PyroMark Q24 MDx Este protocolo describe cómo preparar la estación de vacío PyroMark Q24 MDx antes de usarla para preparar ADN monocatenario. Procedimiento 1. Llene cinco recipientes separados (suministrados con la estación de vacío PyroMark Q24 MDx) de la forma siguiente:... - Página 44 6. Rellene el recipiente 5 con 70 ml de agua ultrapura. 7. Cierre el interruptor de vacío de la herramienta (Off) y sitúe la herramienta en la posición de detención (P). Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 03/2015...
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Página 45: Apéndice B: Vaciado Del Recipiente De Desechos Y De Los Recipientes
Productos químicos peligrosos ADVERTENCIA La solución desnaturalizante PyroMark utilizada en la estación de vacío PyroMark Q24 MDx contiene hidróxido de sodio, que puede provocar irritación de los ojos y de la piel. Lleve siempre gafas protectoras, guantes y una bata de laboratorio. - Página 46 5. En caso de que sea necesario limpiar (de polvo o derramamientos) la estación de vacío PyroMark Q24 MDx, siga las instrucciones descritas en el apartado ”Limpieza de la estación de vacío PyroMark Q24” del Manual de usuario del PyroMark Q24.
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Página 47: Bibliografía
Para obtener una lista bibliográfica completa, visite la base de datos bibliográfica en línea de QIAGEN en www.qiagen.com/RefDB/search.asp o póngase en contacto con el Servicio Técnico de QIAGEN o con su distribuidor local. Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 06/2009... -
Página 48: Información Para Pedidos
Productos relacionados PyroMark Q24 MDx 9001513 Plataforma de detección basada en secuencias para la pirosecuenciación de 24 muestras en paralelo Software de aplicación 9019063 PyroMark Q24 MDx Software Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 03/2015... - Página 49 Para obtener información actualizada sobre licencias y sobre exenciones de responsabilidad específicas del producto, consulte la guía o el manual del usuario del kit de QIAGEN correspondiente. Las guías y los manuales del usuario de los kits de QIAGEN están disponibles en www.qiagen.com o pueden solicitarse al Servicio Técnico de QIAGEN o al distribuidor local.
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- Página 51 Esta página se ha dejado intencionadamente en blanco. Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 06/2009...
- Página 52 Esta página se ha dejado intencionadamente en blanco. Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 03/2015...
- Página 53 (GE Healthcare). Acuerdo de licencia limitada La utilización de este producto implica por parte de cualquier comprador o usuario del PyroMark Q24 Control Oligo la aceptación de los siguientes términos: El PyroMark Q24 Control Oligo puede utilizarse exclusivamente de acuerdo con las indicaciones recogidas en el Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo y empleando únicamente los componentes contenidos en el producto.
- Página 54 Australia Orders 03-9840-9800 Fax 03-9840-9888 Technical 1-800-243-066 Austria Orders 0800/28-10-10 Fax 0800/28-10-19 Technical 0800/28-10-11 Belgium Orders 0800-79612 Fax 0800-79611 Technical 0800-79556 Brazil Orders 0800-557779 Fax 55-11-5079-4001 Technical 0800-557779 ...