Tabla de contenido
Publicidad
Enlaces rápidos
Your
Power
for Health
PapilloCheck
PapilloCheck
Manual de instrucciones
Equipo de diagnóstico para la genotipificación de los tipos 6, 11, 16, 18, 31, 33, 35, 39, 40, 42, 43, 44/55, 45,
51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 70, 73, 82 (PapilloCheck
59, 66, 68 (PapilloCheck
Para uso diagnóstico in vitro
únicamente por parte de personal de laboratorio profesional
Greiner Bio-One GmbH
Maybachstr. 2
72636 Frickenhausen
Alemania
Fabricado en Austria
high-risk) del virus del papiloma humano en muestras cervicouterinas
®
465 060-02
505 060
PELIGRO
®
high-risk
®
) o los tipos 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58,
®
Revisión: BQ-708-00 / Octubre de 2017
48
HPV DNA-Chip
8 °C
4 °C
Publicidad
Tabla de contenido
Manuales relacionados para Greiner Bio-One PapilloCheck
Resumen de contenidos para Greiner Bio-One PapilloCheck
- Página 1 Equipo de diagnóstico para la genotipificación de los tipos 6, 11, 16, 18, 31, 33, 35, 39, 40, 42, 43, 44/55, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 70, 73, 82 (PapilloCheck ) o los tipos 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, ®...
-
Página 2: Derecho Sobre La Marca Registrada
Estos productos se han diseñado exclusivamente para usuarios profesionales (como técnicos o médicos) con formación en técnicas de biología molecular. A menos que se indique lo contrario, en este Manual de instrucciones el nombre PapilloCheck ® utiliza para ambas variantes, PapilloCheck y PapilloCheck high-risk. -
Página 3: Glosario De Símbolos
Greiner Bio-One GmbH Maybachstr. 2 8 °C 72636 Frickenhausen 465 060-02 Alemania 505 060 4 °C Fabricado en Austria PELIGRO Manual de instrucciones de PapilloCheck y PapilloCheck high-risk ® ® Revisión: BQ-708-00 / Octubre de 2017... -
Página 4: Tabla De Contenido
Distribución del microchip PapilloCheck ................15 ® 6.4.2 Controles del microchip .......................16 7. INSTRUCCIONES DE FLUJO DE TRABAJO PARA PAPILLOCHECK ....18 ® 7.1 Instrucciones generales ....................18 7.2 Separación de las salas ....................18 7.3 Advertencias y precauciones ................... 19 7.3.1... - Página 5 Power for Health 11. CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO DE PAPILLOCHECK ....................35 ® 11.1 Rendimiento analítico de PapilloCheck ................ 35 ® 11.1.1 Sensibilidad analítica ......................35 11.1.2 Especificidad analítica - Tipos de VPH ................36 11.1.3 Especificidad analítica - Organismos no VPH ..............36 11.2 Repetibilidad (reproducibilidad intralaboratorio) ............
-
Página 6: Contenido Del Equipo
Tampón de hibridación para 2 x tampón de hibridación para PapilloCheck 2 x 1000 µl ® PapilloCheck ® Tampón A para PapilloCheck 2 x tampón de lavado A para PapilloCheck ® ® 2 x 40 ml concentrado concentrado Tampón B para PapilloCheck 1 x tampón de lavado B para PapilloCheck... -
Página 7: Consumibles, Equipo Y Hardware Necesarios
® Equipo de ensayo PapilloCheck ® high-risk 505 060 1 equipo para 48 reacciones Equipo de toma de muestras PapilloCheck 465 075 1 equipo para 50 muestras ® Equipo de extracción de ADN / Preparación 515 040 1 equipo para 50 preparaciones con una columna oCheck Preparación... - Página 8 • PC (consulte los requisitos del sistema en el Manual de instrucciones de CheckScanner y el software CheckReport ™ ™ Greiner Bio-One GmbH Maybachstr. 2 8 °C El procedimiento de lavado de PapilloCheck requiere tres recipientes de lavado oCheck 72636 Frickenhausen ® ® 465 060-02 Alemania 505 060 4 °C...
-
Página 9: Transporte Y Almacenamiento
No obstante, ® el equipo se debe almacenar a entre 4 y 8 °C inmediatamente después de recibirlo y mantener alejado de la luz. Mantenga la caja para portaobjetos con los microchips PapilloCheck siempre ®... -
Página 10: Instrucciones De Seguridad
Lleve siempre una bata de laboratorio adecuada, guantes desechables y gafas de seguridad, y siga las instrucciones de seguridad proporcionadas en esta sección. Información reglamentaria: Los siguientes componentes del equipo de ensayo PapilloCheck contienen elementos nocivos o ® peligrosos. -
Página 11: Eliminación De Residuos
5. ELIMINACIÓN DE RESIDUOS Your Power for Health Después de lavar y secar el microchip PapilloCheck , las soluciones de lavado I y II se pueden ® desechar sin precauciones especiales. Deseche el microchip PapilloCheck usado, los componentes ® del equipo sin utilizar y la mezcla de hibridación no utilizada con los desechos químicos del laboratorio. -
Página 12: Introducción
PapilloCheck permite la identificación de 18 tipos de alto riesgo y 6 tipos de bajo riesgo ® del virus del papiloma humano (VPH) (Tabla 1), mientras que PapilloCheck high-risk permite la ® identificación de 14 tipos de alto riesgo de virus del papiloma humano genital de alto riesgo (VPHAR) (Tabla 2). -
Página 13: Principio Del Ensayo
, se debe extraer ADN de una muestra de citología cervicouterina. ® La toma de muestras y la extracción de ADN no forman parte del equipo de ensayo PapilloCheck ® Greiner Bio-One también ofrece productos especializados para la toma de muestras (equipo de toma de muestras PapilloCheck ) y la extracción de ADN (equipo de extracción de ADN oCheck... -
Página 14: Ryoeacción Pcr
3. Lavado y secado: se elimina el ADN sin unir en los pasos de lavado subsiguientes. Greiner Bio-One GmbH 4. Escaneo y análisis: el microchip PapilloCheck se escanea, analiza y evalúa de forma automática mediante CheckScanner™ ®... -
Página 15: Diseño Del Microchip Papillocheck
(b): 635 nm; c) canal verde: 532 nm) y dibujos esquemáticos de la distribución de la micromatriz PapilloCheck . Se indican las sondas específicas del tipo de VPH y los ®... -
Página 16: Controles Del Microchip
Power for Health 6.4.2 Controles del microchip El diseño del microchip de ADN PapilloCheck incorpora unos completos controles integrados ® en el microchip. Varios sistemas de control supervisan todos los pasos críticos del ensayo y el procesamiento del microchip, lo que incluye la calidad de la muestra y la extracción de ADN (control de muestra), la calidad de la reacción PCR (control de PCR), la eficiencia de la hibridación (control... - Página 17 Control de orientación y de impresión Your Power for Health Las marcas de control de orientación del microchip PapilloCheck generan señales fluorescentes ® con independencia de la eficiencia del proceso de hibridación. Estas marcas se usan en el software CheckReportTM como puntos de referencia para la búsqueda de marcas correctas, lo que es un requisito previo para poder analizar las señales correctamente.
-
Página 18: Instrucciones De Flujo De Trabajo Para Papillocheck
PapilloCheck y PapilloCheck high-risk. Al seguir el procedimiento descrito para PapilloCheck ® ® ® utilice exclusivamente los componentes del equipo de ensayo PapilloCheck . Al seguir el ® procedimiento descrito para PapilloCheck high-risk utilice exclusivamente los componentes del ® equipo de ensayo PapilloCheck high-risk. -
Página 19: Advertencias Y Precauciones
• Cuando reciba el equipo, compruebe que los componentes no estén dañados. Si uno de los componentes estuviera dañado (por ejemplo, frascos de tampón), póngase en contacto con su distribuidor local de Greiner Bio-One. No utilice los componentes dañados del equipo, ya que podría obtener unos resultados deficientes. -
Página 20: Seguridad En El Trabajo
Información técnica y servicios Centro de descarga Greiner Bio-One GmbH Maybachstr. 2 8 °C 72636 Frickenhausen 465 060-02 Alemania 505 060 4 °C Fabricado en Austria PELIGRO Manual de instrucciones de PapilloCheck y PapilloCheck high-risk ® ® Revisión: BQ-708-00 / Octubre de 2017... -
Página 21: Procedimiento De Uso De Papillocheck
Toma de muestras y extracción de ADN 8.1.1 Toma de muestras La toma de muestras no forma parte del procedimiento de uso del equipo de ensayo PapilloCheck ® Greiner Bio-One también ofrece un equipo de toma de muestras especializado (equipo de toma de muestras PapilloCheck );... - Página 22 Capítulo 8.1.2 Extracción de ADN Capítulo 8.2 PCR Capítulo 8.3.2 Hibridación Capítula 8.3.3 Lavado y secado Capítulo 8.4 Escaneado y evaluación Figura 4: Resumen de los diferentes pasos de trabajo de PapilloCheck ® Manual de instrucciones de PapilloCheck y PapilloCheck high-risk ®...
-
Página 23: Extracción De Adn
8.1.2 Extracción de ADN La extracción de ADN no forma parte del procedimiento de uso del equipo de ensayo PapilloCheck ® La extracción de ADN antes del análisis PapilloCheck se debe realizar con el equipo de extracción ® de ADN oCheck , también suministrado por Greiner Bio-One (consulte la información sobre pedidos... -
Página 24: Preparación Del Termociclador
Es absolutamente necesario usar uno de los termocicladores mencionados anteriormente para lograr el rendimiento previsto. El programa del termociclador de la PCR PapilloCheck se resume en la Tabla 3. ® Tabla 3: Programa del termociclador para la PCR PapilloCheck ® Tiempo Temp. °C N.º de ciclos 20 min 37 °C... -
Página 25: Preparación De La Reacción De Pcr
En general, para el tratamiento de UNG, la mezcla de reacción de PCR se incuba durante 20 minutos a 37 °C. Posteriormente, la UNG se desactiva mediante un paso de incubación adicional de 15 minutos a 95 °C. Estos dos pasos ya están incorporados en el ensayo PCR PapilloCheck ®... - Página 26 Una vez completada la PCR, los productos de la amplificación se deben utilizar inmediatamente para la hibridación, o bien almacenar a oscuras a ≤ -20 °C durante una semana. Tabla 4: Preparación de la reacción PCR PapilloCheck ® 13 reacciones...
-
Página 27: Hibridación Y Lavado
10 minutos. El soporte de portaobjetos magnético de la cámara de hibridación contiene un imán solamente en uno de sus extremos. Si se van a hibridar en paralelo menos de cuatro microchips PapilloCheck , procure llenar el soporte ®... -
Página 28: Hibridación
8.3.2 Hibridación La hibridación se debe llevar a cabo a temperatura ambiente entre 20 y 25 °C. Los principales pasos de trabajo para la hibridación de los productos de PCR de la reacción PCR PapilloCheck PCR en ® el microchip PapilloCheck se muestran en la Figura 5. - Página 29 PCR con 5 µl del producto de la PCR. Mézclelo bien. Transfiera 25 µl de la mezcla de hibridación a cada pocillo del microchip PapilloCheck ® usando una multipipeta. Cierre la cámara de hibridación e incube ...
-
Página 30: Lavado Y Secado
8.3.3 Lavado y secado El equipo especializado suministrado por Greiner Bio-One permite realizar el lavado en paralelo de hasta cuatro microchips PapilloCheck (consulte el capítulo 2). El equipo adicional necesario para ® procesar los microchips PapilloCheck se compone de tres recipientes de lavado oCheck y un asa ®... - Página 31 1 minuto 500 g máx. velocidad Figura 6: Pasos de trabajo del procedimiento de lavado Diferentes pasos de lavado y procedimiento de secado antes del análisis del microchip PapilloCheck con CheckScanner™ ® y el software CheckReport™. Manual de instrucciones de PapilloCheck...
-
Página 32: Escaneado Y Evaluación Del Microchip Papillocheck
CheckScanner™ y el software CheckReport™. Siempre que se analicen datos con el software CheckReport™, asegúrese de que la versión del software CheckReport™ instalada en el PC coincida con la indicada en el equipo PapilloCheck ® usado actualmente. Si las versiones no coinciden, actualice el software CheckReport™. La versión más reciente del software se puede descargar en el sitio web de Greiner Bio-One:... -
Página 33: Solución De Problemas
® describe a continuación. No dude en ponerse en contacto con el distribuidor local de Greiner Bio- One si tiene alguna pregunta o experimenta dificultades al usar PapilloCheck ® Para solucionar problemas relacionados con otros pasos del ensayo, por ejemplo, la extracción de ADN, consulte el Manual de instrucciones respectivo. -
Página 34: Asistencia Técnica
Si tiene alguna pregunta o duda o experimenta dificultades en relación con los productos Greiner Bio- One, no dude en ponerse en contacto con el distribuidor local de Greiner Bio-One o el departamento de asistencia técnica support.dx@gbo.com, que cuenta con científicos expertos con amplios conocimientos prácticos y teóricos sobre biología molecular. -
Página 35: Características De Rendimiento De Papillocheck
Para evaluar la sensibilidad analítica, el límite de detección (LoD95 = número mínimo de copias de ADN objetivo que se pueden detectar en el 95 % de los casos) se estableció tomando como referencia los plásmidos de cada tipo VPH detectable que contiene la región E1 objetivo de PapilloCheck ®... -
Página 36: Especificidad Analítica - Tipos De Vph
Asimismo, la evaluación de repetibilidad descrita se llevó a cabo en 3 zonas de prueba por lo que, en total, se realizaron 216 análisis. Se obtuvo una concordancia del 100 % en los 3 análisis de repetibilidad (consulte la tabla 7). Tabla 7: Resultados de los análisis de repetibilidad con PapilloCheck ® Ubicación de prueba... -
Página 37: Reproducibilidad
Se obtuvo una concordancia del 100 % para los resultados de las diferentes ubicaciones de prueba. 11.4 Solidez Con el fin de evaluar la eficacia del sistema de ensayo PapilloCheck , se consideraron variaciones ® de los siguientes parámetros: •... -
Página 38: Rendimiento Clínico De Papillocheck
11.5 Rendimiento clínico de PapilloCheck ® Your Power for Health Para determinar el rendimiento clínico de los ensayos PapilloCheck y PapilloCheck high- ® ® risk en términos de especificidad y sensibilidad clínicas, se realizó un estudio comparativo con PapilloCheck y el ensayo GP5+/6+-PCR EIA . - Página 39 Para evaluar la reproducibilidad del ensayo PapilloCheck con muestras clínicas, en 2012 se llevó a ® Your Power for Health cabo un estudio en los Países Bajos y Alemania. En el estudio se utilizaron muestras cervicouterinas obtenidas de una cohorte de 10 000 mujeres que participaron en un cribado citológico cervicouterino regular en la provincia de Utrecht (Países...
-
Página 40: Protocolo Reducido Papillocheck
Divida la mezcla maestra final en alícuotas: añada 21 µl de la mezcla de reacción para cada reacción PCR en un microtubo para PCR de 0,2 ml de una banda PCR Manual de instrucciones de PapilloCheck Manual de instrucciones de PapilloCheck y PapilloCheck y PapilloCheck... -
Página 41: Sala 2: Adición De La Plantilla De Pcr-Adn/Reacción Pcr
25 s 55 °C 45 s 72 °C 30 s 95 °C 45 s 72 °C Espera 10 °C Manual de instrucciones de PapilloCheck Manual de instrucciones de PapilloCheck y PapilloCheck y PapilloCheck high-risk high-risk ® ® ® ® Revisión: BQ-708-00 / Octubre de 2017... -
Página 42: Sala 3: Hibridación - Preparación/Reacción De Hibridación
Mezcle los productos de la PCR y centrifúguelos brevemente Mezcle el tampón de hibridación y centrifúguelo brevemente Mezcle 30 µl de tampón de hibridación PapilloCheck con 5 µl de producto ® de PCR Mézclelo bien y centrifúguelo brevemente... -
Página 43: Sala 3: Lavado Y Secado/Escaneado Y Evaluación
María a 50 °C durante 60 segundos Lave el microchip o los microchips PapilloCheck en la solución de lavado III ® a temperatura ambiente durante 10 segundos Retire el líquido de la superficie del microchip PapilloCheck ® mediante centrifugado 3 minutos...