Muestras; Toma De Muestras; Almacenamiento De Las Muestras; Dilución De Las Muestras - DRG EIA-2395 Instrucciones De Uso

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MUESTRAS

En este ensayo pueden usarse suero o plasma.
No usar muestras hemolíticas, ictéricas o lipémicas.
Tener en cuenta: No deben usarse muestras que contengan acida sódica.
5.1

Toma de muestras

Suero:
Recoger la sangre por punción en la vena (ej. Sarstedt Monovette para el suero), permitir coagulación, y separar el suero
por centrifugación a temperatura ambiente. No centrifugar antes de la coagulación completa. Las muestras de pacientes
que reciben terapia anticoagulante requieren más tiempo para coagular.
Plasma:
Toda la sangre ha de recogerse en tubos de centrífuga que contengan anticoagulante (Ej. Sarstedt Monovette con una
preparación adecuada para el plasma) y centrifugar inmediatamente tras la recogida.
5.2

Almacenamiento de las muestras

Las muestras deben ser tapadas y pueden ser almacenadas hasta 24 horas a 2 °C - 8 °C antes del ensayo.
Las muestras almacenadas por un período de tiempo mas largo han de congelarse sólo una vez a -20 °C antes del
ensayo. Las muestras descongeladas deben invertirse varias veces antes del ensayo.
5.3 Dilución de las muestras
Si en un ensayo inicial, se encuentra una muestra que presenta valores mayores que el estándar mas concentrado, ha
de diluirse con Standard 0 y volver a ensayarse como se describe en el Procedimiento de Ensayo.
Para el cálculo de las concentraciones habrá que tener en cuenta el factor de dilución.
Ejemplo:
a) dilución 1:10: 10 µL muestra + 90 µL Standard 0 (mezclar totalmente)
b) dilución 1:100: 10 µL dilución a) 1:10 + 90 µL Standard 0 (mezclar totalmente).
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PROCEDIMIENTO DE ENSAYO

6.1

Consideraciones generales

− Todos los reactivos y muestras han de estar a temperatura ambiente antes de su uso. Todos los reactivos deben
mezclarse sin formar espuma.
− Una vez se ha comenzado el ensayo deben completarse todos los pasos sin interrupción.
− Utilizar puntas de pipeta de plástico nuevas para cada estándar, control o muestra para evitar combinaciones
cruzadas.
− La absorbancia es función del tiempo de incubación y la temperatura. Antes de comenzar el ensayo, se recomienda
que todos los reactivos estén preparados, tapas removidas, todos los pocillos que se necesiten asegurados en
recipiente, etc. Esto asegurará un tiempo similar para cada paso de pipeteo sin que haya interrupciones.
− Como regla general, la reacción enzimática es linealmente proporcional al tiempo y a la temperatura.
Version 10.0 2017/05 - vk
Leptin Sandwich ELISA EIA-2395
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