Selección De La Longitud De Onda De Excitación; Excitación De La Muestra; Cubeta De Flujo - WATERS CORPORATION 2475 Multi Guia De Funcionamiento

Selección de la longitud de onda de excitación
La longitud de onda de exitación a elegir requiere algún tipo de filtración de
fuente de luz. En los detectores modernos se usa un monocromador con este
propósito.
Un monocromador es un dispositivo regulable que se usa para seleccionar la
longitud de onda de una gran variedad de espectros. Un monocromador de
difracción usa una red de difracción que deja pasar sólo una pequeña
variedad, o ancho de banda, de longitudes de onda. Se puede seleccionar las
longitudes de onda, dentro de una determinada variedad de longitudes de ona,
moviendo la red de difracción. Un monocromador de difracción además filtra
fracciones, u órdenes, de una longitud de onda seleccionada. Por ejemplo, si el
monocromador se configura para que filtre la energía de la luz a 600 nm,
además filtra energía en un segundo orden de longitud de onda de 300 nm. Se
puede usar un filtro amplio para absorber la energía de orden superior
producida por un monocromador. Al seleccionar un monocromador la
excitación, la emisión (energía irradiada) también se puede seleccionar. Los
detectores con monocromadores de excitación y emisión pueden hacer un
barrido manteniendo la configuración de un monocromador y cambiando la del
otro. Este tipo de funcionamiento es necesario cuando se evalúan mezclas o se
analizan estructuras químicas.
Excitación de la muestra
La banda ancha de la luz de gran intensidad de la lámpara pasa a través de
un filtro o monocromador, que selecciona una banda estrecha de longitudes de
onda. Esta banda estrecha de luz después se dirige a la celda de flujo, donde
excita a los analitos al pasar. Las longitudes de onda de excitación a menudo
se corresponden con la longitud de onda de absorbancia del analito.

Cubeta de flujo

La celda de flujo de cuarzo minimiza la cantidad de luz difusa que puede
afectar la medición, y maximiza la señal de fluorescencia. El compartimento
de muestras se dispone de tal manera que la energía de fluorescencia se
capture en un ángulo perpendicular al haz (lámpara) de excitación. Esta
disposición minimiza el efecto de la difusión de Rayleigh en niveles de luz de
fondo.
1-4 Teoría de funcionamiento