Viscosidad de los eluyentes
Por lo general, la viscosidad no es importante cuando se trabaja con un solo
eluyente o bajo presión baja. No obstante, cuando se analiza en gradiente, los
cambios en la viscosidad que se producen a medida que se mezclan los
eluyentes en diferentes proporciones, pueden dar lugar a cambios en la
presión durante el análisis. Por ejemplo, una mezcla de 1:1 de agua y metanol
produce el doble de presión que el agua o el metanol por sí solos.
Si se desconoce el alcance de los efectos que el cambio en la presión pudiera
ejercer en el análisis, se debe controlar la presión durante el análisis usando el
terminal Chart Out (Gráfico salida).
Desgasificación del eluyente de la fase móvil
Los problemas con la fase móvil suponen al menos un 70% de todos los
problemas de cromatografía líquida. La utilización de eluyentes desgasificados
es importante, especialmente en las longitudes de onda de excitación
inferiores a 220 nm. La desgasificación proporciona los siguientes beneficios:
•
Líneas base estables y una sensibilidad mejorada
•
Tiempos de retención reproducibles para los picos eluyentes.
•
Volúmenes de inyección reproducibles para la cuantificación
•
Funcionamiento de la bomba estable
Esta sección explica la solubilidad de gases, los métodos de desgasificación de
eluyentes y las consideraciones de desgasificación de eluyentes.
Solubilidad del gas
Solamente se puede disolver una cantidad finita de gas en un volumen de
líquido dado. Dicha cantidad depende de:
•
La afinidad química del gas respecto al líquido
•
La temperatura del líquido
•
La presión aplicada al líquido
Los cambios en la composición, la temperatura o la presión de la fase móvil
pueden conducir a la eliminación de gas.
Viscosidad de los eluyentes
C-7