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20.
Evitación de contaminación microbiana
Las contaminaciones microbiológicas más importantes en el cultivo de células y tejidos estás provocadas
por bacterias, hongos, levaduras, micoplasmas y virus. Este capítulo ofrece un resumen sobre las posibles
fuentes de contaminación y sobre precauciones y contramedidas.
20.1 Células y medios
• Cultivos primarios de tejido original: supervisión y pruebas rutinarios de los cultivos.
• Células / Líneas celulares de procedencia desconocida o de bancos celulares: use sólo células de
procedencia conocida y certificada. Supervisión y pruebas rutinarios de nuevos cultivos.
• Medios y sueros: use sólo sueros de procedencia conocida y certificada (sueros sin micoplasmas, p.
ej. irradiados con UV o γ).
• Suspensiones víricas, soluciones de anticuerpos, etc.: use sólo sustancias de procedencia conocida y
certificada.
• Esterilice / Trate en autoclave / Deseche equipos de laboratorio, medios, reactivos que posiblemente
hayan estado en contacto con cultivos.
• El uso de antibióticos en medios de cultivos celulares puede impedir la detección de bacterias: use
antibióticos de forma adecuada y reducida.
20.2 Equipamiento de laboratorio y entorno de la incubadora de CO
Las fuentes de contaminación en el laboratorio de cultivo celular son gérmenes del aire ambiental, equipos
de laboratorio, condiciones arquitectónicas y el personal de laboratorio.
• Conserve de forma estéril las pipetas y los instrumentos tras el manejo con autoclave.
• Banco de trabajo estéril (Laminar Flow Bench): en la medida de lo posible, tenga pocos objetos aparte
de equipos de succión y quemadores. Coloque el material de trabajo al alcance y separado entre sí.
Desinfecte la superficie con una solución alcohólica antes y después del uso. Limpie debajo del banco
de trabajo. Realice pruebas periódicas de esterilidad del filtro.
• Limpie/Desinfecte regularmente los equipos de laboratorio como centrifugadora, microscopio, baño de
agua, frigorífico y teléfono.
• No coloque los equipos en el suelo.
• Las paredes rugosas o húmedas no son convenientes.
• Selle las puertas y ventanas no herméticas.
• Equipe el climatizador con filtros especiales.
• Reduzca el número de personas y su tránsito en el laboratorio, provocado por acciones sin especificar
y la retirada de equipos necesarios, con una buena organización y trayectos cortos. Resulta lógico
colocar el equipo cerca del banco de trabajo estéril.
• Realice supervisiones microbiológicas periódicas en el laboratorio de cultivo celular.
20.3 Trabajo y conducta en el laboratorio
Las fuentes de contaminación proceden del propio personal del laboratorio (gérmenes adheridos, transmi-
sión de gotitas de la flora bucal) y el manejo de equipos y cultivos. Recomendamos que el personal se
forme en técnicas asépticas, seguridad en el laboratorio y buenas prácticas en el laboratorio (GLP).
CB / CB-UL, CBF / CBF-UL (E7) 01/2022
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