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4 Descripción del instrumento
imágenes resultantes de la muestra. Además, podría haber distorsiones dentro de una
imagen, como las ocasionadas por aberraciones de los objetivos o por un espejo
deformado. Por este motivo, también es conveniente realizar la alineación de
imágenes en los sistemas de una cámara.
Opera Phenix cuenta ahora con un procedimiento de alineación de imágenes
completamente automático en el que se usa una muestra de alineación patentada
conectada a la mesa de exploración. Las imágenes de esta muestra duradera se
adquieren cada vez que se inicia una medición (prueba). La alineación de imágenes se
omite para instantáneas a fin de agilizar la configuración del experimento. Una
excepción es el canal FRET, donde también se realiza la alineación de imágenes para
instantáneas, ya que se adquieren dos canales. Si una medición posterior tiene los
mismos ajustes ópticos, se vuelven a utilizar los parámetros de alineación de
imágenes.
Las estructuras detectadas en las imágenes adquiridas de la muestra de alineación se
correlacionan con la imagen ideal de la muestra y de este modo se calcula la
transformación de las imágenes de cada canal. Esta información se aplica a cada
imagen de la siguiente medición y las imágenes corregidas se guardan y se muestran.
El procedimiento de alineación tiene un control de calidad incorporado. Si la alineación
no aprueba el control, el procedimiento se repite. En todo caso, una medición solo se
iniciará si se aprueba el control de calidad para garantizar que las imágenes del
análisis se alineen óptimamente.
Si el procedimiento de alineación de imágenes falla repetidamente, limpie el objetivo.
Si con eso no se obtiene una mejoría, consulte la ayuda en línea de Harmony, sección
«Image Alignment Procedure Fails Repeatedly», para solucionar el problema.
Tenga en cuenta que mientras el instrumento se está calentando (sobre todo si se
utiliza Environmental Control), las propiedades ópticas del sistema podrían cambiar y
los parámetros de alineación previamente calculados ya no quedarán ajustados de
forma óptima Por este motivo, se recomienda activar una alineación de imagen justo
antes de hacer la medición.
Una manera fácil de reemplazar los parámetros existentes es cambiar del modo
confocal al modo no confocal, o viceversa, y hacer clic en Test (Prueba). Después de
establecer otra vez los ajustes del experimento y una vez que se inicie la medición, la
alineación de imágenes se repetirá automáticamente.
Tenga en cuenta que el procedimiento de alineación requiere el láser UV (405/425 nm)
y que no podrá seguir realizando mediciones sin él.
Opera Phenix Plus: Manual del usuario
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