Resultados De Tp-Pcr - Imegen SCAs Instrucciones De Uso

Tabla 6. Repeticiones y tamaño de los alelos del control positivo en cada sistema
Debido a la presencia de restos de cebadores marcados no consumidos durante la PCR y TP-PCR
y a dímeros de primers, se pueden detectar picos inespecíficos, pero siempre fuera del rango de
análisis, por lo que no interfieren con la buena interpretación de los resultados. Además, estos
picos nunca presentarán las características de los picos debidos a repeticiones en tándem de
trinucleótidos: presencia de un pico real de tamaño mayor, y uno o varios picos de tartamudeo,
siempre inferiores al real y separados de éste por tres pares de bases.

8.1 Resultados de TP-PCR

Es necesario evaluar los resultados de la TP-PCR (Triplet Repeat primed Polymerase Chain
Reaction) en aquellas muestras donde se esté analizando SCA2 y SCA7 y sólo se haya observado
un alelo (un pico) en el electroferograma resultante de la PCR de SCA2 y SCA7. Por tanto, la TP-
PCR permite diferenciar las muestras homocigotas para alelos normales, de las muestras con
alelos expandidos que no pueden ser detectados por PCR convencional, debido a su gran tamaño.
Esta técnica permite la detección de expansiones de cualquier tamaño, aunque la identificación
del alelo de mayor tamaño generalmente no permite la determinación del número de
repeticiones.
A continuación, se muestran una serie de imágenes como ejemplo del resultado obtenido para
una muestra con alelo expandido y una muestra sin expansión para los dos sistemas analizados
por TP-PCR.
Rev. 5 28/02/2020
Sistema nº pares de bases
SCA1 226
SCA2 163
SCA3 229
SCA6 135
SCA7 281
SCA12 159
SCA17 229
DRPLA 148
nº repeticiones
229 29
163 22
241 23
135 13
287 11
165 12
241 34
163 12
30
22
27
13
13
14
38
17
Página 18 de 22