Publicidad
Idiomas disponibles
Idiomas disponibles
制备
试剂
1.
按照试剂盒随附的文件或完整版 《用户指南》
（网上） 中的说明制备和存放试剂盒。
2.
让以下低温储存的产品平衡至室温
（20–25°C约10分钟） 。
IEF芯片
•
PAGE芯片
•
复水溶液
•
DTT溶液
•
两性电解质
•
3.
制备用于IEF芯片复水以及蛋白质样品提取/
稀释的工作复水溶液：
试剂
体积
最终浓度
复水溶液
189 µL
DTT溶液 (1M)
10 µL
50 mM
两性电解质
1–2 µL
0.5–1% v/v
*
总计
200 µL
根据所使用的IEF芯片的范围选择两性电解质。
*
对于原液浓度为40％ w/v的两性电解质， 添加
1 µL。 对于100X的两性电解质， 添加2 µL。
4.
在SDS-PAGE之前， 制备工作平衡缓冲液以平衡
聚焦蛋白质。
试剂
体积
最终浓度
平衡缓冲液预
760 µL
混液
DTT溶液 (1M)
40 µL
50 mM
总计
800 µL
20424817 Rev 06/21
All manuals and user guides at all-guides.com
制备样品
将蛋白质样品溶解于按照步骤3制备的工作复水溶液中。
可以用工作复水溶液将样品稀释2倍或更多倍， 以达到想
要的蛋白质浓度， 并降低盐浓度。
盐浓度过高会影响等电聚焦过程中的蛋白质分离， 并造
成电流超过100 µA。 高盐浓度的样品应通过以下方法
之一脱盐：
TCA/丙酮沉淀， 然后将蛋白质在工作复水溶液
中重悬
或者
使用旋转柱进行缓冲液交换
说明： 在蛋白质重悬过程中， 避免将蛋白质加热到37°C
以上。
量化蛋白质。 可以加载0.1–25 µg的蛋白质进行2D电泳。
最佳蛋白质量取决于检测方法和样品复杂性。 应将以
下蛋白质量作为起点， 用户可能需要优化其特定样品的
上样量。
考马斯亮蓝染色： 25 µg
•
荧光染色： 10 µg
•
银染： 5 µg
•
荧光预标记： 3 µg
•
应用于设备的样品量为10–12 µL。 必要时， 可用工作复
水溶液稀释样品。
接通Auto2D
设备的电源
®
选择与您所在国家/地区的电源插座兼容的适当电源线
（设备随附） 。 将匹配的一端牢固地插入Auto2D
设备的
®
背面， 将另一端牢固地插入电源插座。
电源开关位于Auto2D
设备背面的交流插口旁边。
®
向上按开关打开电源。
应用程序将自动启动。 在屏幕上， 选择Auto2D
型
®
（原始型） 。
42
加载配方
选择 " SETTING （设置） > RECIPE （配方） " 。
按 "配方信息" 屏幕。 这时将出现配方选择对话框。
选择 "RECIPE NAME （配方名称） > LOAD （加载） >
OK （确定） > EXIT （退出） 。
说明： 确认所需的配方名称显示在屏幕的右上方。
芯片组装
PAGE芯片
E芯片
1.
撕下芯片阳极侧的白色胶带。
2.
小心地取下芯片阴极侧的塑料盖。
3.
用蒸馏水轻轻冲洗阳极和阴极缓冲液孔。 使用纸
巾小心擦掉芯片顶部的所有液体， 确保不要损坏
芯片阴极侧的薄凝胶条。
Chinese
20424817 Rev 06/21
将芯片插入托盘
在Auto2D
设备触摸屏上， 选择 "OPEN （打开） > OK
®
（确定） " 。 托盘打开后， 放入PAGE芯片
（图中以浅蓝色
线条表示）
， 让阳极侧朝前。 将溶液芯片
线条表示）
放在PAGE芯片的顶部， 切角朝前。
涂抹溶液
阴极侧
3
3
阳极侧
1.
阴极缓冲液， 4500 µL
2.
阳极缓冲液， 4000 µL
3.
蒸馏水， 4000 µL
4.
工作复水溶液
a. 700 µL
b. 700 µL （ 可选）
c. 700 µL （ 可选）
5.
工作复水溶液， 100 µL
6.
样品溶液， 10–12 µL
7.
分子量标记
0.5–0.7 µL
*
不能含有SDS或溴苯酚蓝
*
43
（图中以深蓝色
1
7
6
5
a
4
b
c
2
Chinese
Publicidad
