8.3
Hibridación y lavado
8.3.1
Preparación
La hibridación se debe realizar a temperatura ambiente (20-25 °C). Comience con los preparativos
necesarios para la hibridación y los pasos de lavado al menos 30 minutos antes de iniciar el
procedimiento de hibridación.
Para disolver los potenciales precipitados en los tampones de lavado e hibridación, expóngalos
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a temperatura ambiente (20-25 °C) durante 30 minutos y mézclelos bien antes de usarlos.
El almacenamiento del equipo de ensayo PapilloCheck
precipitación de dodecilsulfato de sodio en los tampones B y de hibridación. Deje que las soluciones
se equilibren a temperatura ambiente y después mezcle el tubo en el Vortex o agite el frasco hasta
que se disuelvan los precipitados.
Prepare la cámara de hibridación oCheck
➠
la cámara de hibridación y cierre la tapa para crear una atmósfera saturada de humedad.
Para evitar la evaporación del pequeño volumen de mezcla de hibridación utilizada en el microchip,
es necesario realizar la hibridación en una atmósfera saturada de humedad. Greiner Bio-One
suministra una cámara de hibridación especializada para el análisis PapilloCheck
capítulo 2).
Incube la cantidad necesaria de microchips PapilloCheck
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a temperatura ambiente (20-25 °C) durante al menos 10 minutos.
!
El soporte de portaobjetos magnético de la cámara de hibridación contiene un imán solamente en uno de
sus extremos. Si se van a hibridar en paralelo menos de cuatro microchips PapilloCheck
llenar el soporte con microchips PapilloCheck
los microchips PapilloCheck
Prepare las soluciones de lavado I, II y III según las siguientes instrucciones.
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Preparación de las soluciones de lavado I, II y III:
Prepare la mezcla de solución de lavado para las soluciones de lavado I, II y III adecuadas para
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el número de microchips PapilloCheck
Divida tres alícuotas con el mismo volumen de mezcla de solución de lavado en tres recipientes
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de lavado oCheck
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de lavado oCheck
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lavado necesaria para un máximo de 4 microchips. Use esta escala para comprobar la cantidad
de tampón.
Precaliente la solución de lavado II a 50 °C en un baño María con temperatura controlada
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durante al menos 20 minutos antes de usarla. Asegúrese de que el nivel de llenado del baño
María sea equivalente al de la solución de lavado II.
PapilloCheck
- Manual de instrucciones
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Revisión: BQ-013-07 / Agosto de 2011
: coloque una nueva toallita de papel humedecida en
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no quedarán sumergidos durante el procedimiento de lavado.
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que se vayan a analizar, como se muestra en la tabla 4.
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diferentes y etiquételas como solución de lavado I, II y III. Cada recipiente
contiene una escala grabada, que indica la cantidad correcta de solución de
a 4-8 °C puede dar como resultado la
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en la cámara de hibridación preparada
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empezando desde el lado opuesto al imán. De lo contrario,
(consulte el
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, tenga cuidado de
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