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6 Procedimiento previo a la síntesis
6.2 Preparación de las soluciones
Reactivo
Activador
Reactivo de oxida-
ción
Reactivo de tapona-
do A
Reactivo de tapona-
do B
84
Descripción
GE recomienda el empleo de BTT (benzil-tio-tetrazol) como
activador, en una concentración de 0,3 M. Para la síntesis de
ADN, basta una concentración de 0,25 M.
Asegúrese de que el activador se ha disuelto por completo y
agregue cribas moleculares de 3 Å (suficientes para cubrir los
filtros) antes de conectar la botella a la línea 16 del panel de
entrada de reactivos de ÄKTA oligopilot plus; consulte la
ción 6.5 Conexión de reactivos y soluciones al panel de entrada,
en la página
93.
Nota:
•
Asegúrese de que el activador se haya disuelto por completo.
Su disolución se ralentiza a medida que aumenta la satura-
ción.
•
No incorpore las cribas moleculares hasta que se haya di-
suelto el activador.
•
El activador puede cristalizar en la solución a temperaturas
inferiores a los 18 °C. Si es el caso, agite con firmeza la solu-
ción activadora a temperatura ambiente hasta que se
aclare.
El reactivo de oxidación es yodo a 50 mM (12,7 g I
de solución) en agua/piridina en proporción 1:9 (v/v).
El reactivo de taponado A es N-metilimidazol al 20 % (v/v) en
acetonitrilo. Este reactivo se comercializa en formato de solu-
ción lista para el uso.
El reactivo de taponado B es anhídrido acético al 20 % en S-
colidina al 30 %, o lutidina, y acetonitrilo al 50 %. Este reactivo
se comercializa en formato de dos soluciones listas para el
uso que deben mezclarse justo antes de su empleo.
ÄKTA oligopilot plus Instrucciones de funcionamiento 28959748 AE
Sec-
por 1 litro
2
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