Optika Italy B-380 Manual De Instrucciones página 30

El ejemplo muestra un excelente contraste cuando la luz difractada y la luz directa (no desviada) están retar-
dadas 1/2 longitud de onda. El método de fases Zernike consiste en acelerar la luz directa 1/4 de longitud de
onda, por lo que la diferencia de onda entre la luz directe y la luz difractada de una muestra transparente es
precisamente 1/2 longitud de onda. Como resultado, los dos componentes de la luz (directa y difractada) produ-
cen interferencia "destructiva" en el ocular. Este método produce una imagen con detalles más oscuros sobre
un fondo más claro. Este tipo se conoce como contraste de fase positiva (Figura 2).
Una segunda opción consiste en la retardación de la luz directa 1/4 de longitud de onda, de éste modo am- bas
luces (directa y difractada) producen una interferencia "constructiva" en el ocular. Este método produce una
imagen con detalles de la muestra más claros sobre un fondo oscuro. Este tipo se conoce como contras- te de
fases negativo. (Figura 3)
Los accesorios necesarios para la operación en contraste de fase son un condensador para colocado debajo
de la platina, equipado con anillos de fases, y un conjunto de objetivos para contraste de fase, cada uno con
anillo de fases interno. Incluye también un filtro verde (para aumentar la resolución) y un ocular telescópico de
fases (para centrar los anillos).
Las técnicas de microscopía de fase son particularmente útiles con muestras delgadas y repartidas en el campo
visual. Existen ciertas limitaciones en esta técnica:
• Las imágenes de fase están generalmente afectados por aureolas alrededor de la células. Estas aureolas
son "artefactos" ópticos, que a veces pueden oscurecer los límites entre muestras adyacentes.
• Los anillos de fase limitan la apertura numérica del sistema óptico, reduciendo de ese modo la resolución.
• El contraste de fase no funciona con muestras gruesas, porque las variaciones de fase se producen en las
zonas justo por encima o por debajo del plano de enfoque.
• Las imágenes en contraste de fases pueden aparecen en gris si se utiliza luz blanca o verde si se utiliza un
filtro verde.
Figura 2
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Figura 3