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5 Funcionamiento
5.2 Módulo de electrotransferencia
5.2.1 Preparación del módulo de electrotransferencia
Preparación de componentes de pila
de transferencia
Siga estos pasos para preparar los componentes de la pila de transferencia.
Nota:
Paso
1
2
3
4
5
Preparación de una pila de
transferencia
Siga las instrucciones indicadas a continuación para preparar la pila de transferencia.
Transfiera la muestra lo antes posible tras la electroforesis para minimizar la difusión
de la muestra en el gel. La transferencia electroforética se puede realizar hasta en
cuatro minigeles a la vez si se colocan dos geles en cada uno de los dos módulos.
Nota:
40
Utilice guantes siempre que manipule membranas para no dejarles huellas.
Acción
Por cada gel, corte la membrana y dos trozos de papel de filtro del mismo
tamaño que el gel, pero no mayor de 8,5 × 10,5 cm.
Nota:
El gel determina el tamaño de la membrana y del papel de filtro.
Equilibre el gel en la solución buffer de transferencia durante 10 minutos.
Consejo:
El equilibrado permite que el gel se dilate o se contraiga al entrar en contacto
con la membrana de transferencia y elimina el exceso de sales de la solución
buffer y los detergentes del gel. Un equilibrado demasiado largo podría
ocasionar bandas difusas.
Moje con antelación las membranas de nitrocelulosa o nailon en agua desti-
lada, con cuidado de que no queden burbujas de aire atrapadas. Introduzca
un extremo de la membrana en la solución buffer y vaya sumergiéndola
lentamente para que se empape por capilaridad.
Prehumedezca las membranas de PVDF y otras hidrófobas con metanol.
Una vez prehumedecida la membrana, manténgala en remojo en solución
buffer de transferencia 2 - 5 min.
Moje el papel de filtro con solución buffer de transferencia.
Utilice guantes siempre que manipule membranas para no dejarles huellas.
miniVE Instrucciones de funcionamiento 29281778 AB
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