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8. Diluya el cebador de secuenciación a 0,3 µM en tampón
9. Inmediatamente después de la inmovilización (véase la
10. Abra el interruptor de vacío para aplicar vacío a la
11. Baje con cuidado las sondas de filtro al interior de la
12. Asegúrese de que el líquido es aspirado de los pocillos y
13. Transfiera la herramienta al recipiente que contiene
Manual de usuario del PyroMark Q24 MDx 01/2016
de annealing. Añada 25 µl de la solución a cada pocillo
de la placa PyroMark Q24 que vaya a utilizar.
Nota: Use uno de los portaplacas PyroMark Q24
suministrados como soporte cuando prepare y mueva la
placa.
sección 5.3.3), coloque la placa PCR (o las tiras) y la
placa PyroMark Q24 sobre la mesa de trabajo.
Asegúrese de que la placa tenga la misma orientación
que durante la carga de las muestras; utilice la imagen
siguiente como referencia.
herramienta de preparación del vacío.
placa PCR (o de las tiras) para capturar las microesferas
que contienen el molde inmovilizado. Mantenga las
sondas de filtro en esta posición durante 15 s. Tenga
cuidado cuando recoja la herramienta.
Nota: Las microesferas de sefarosa sedimentan
rápidamente. Si ha transcurrido más de 1 min desde la
agitación de la placa (o de las tiras), vuelva a agitar
durante 1 min antes de capturar las microesferas.
de que todas las microesferas han sido capturadas en
las puntas de las sondas de filtro.
Nota: Si los pocillos todavía contienen líquido o quedan
microesferas blancas, es posible que deba sustituir las
sondas de filtro (véase la sección 6.3.2).
etanol al 70%. Enjuague las sondas de filtro durante 5 s.
Procedimientos operativos
5-17
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