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Método
Column Prepa-
ration
Desalting (DS)
Gel Filtration
(GF)
Hydrophobic
Interaction Ch-
romatography
(HIC)
Intelligent Pac-
king
Reversed Phase
Chromatograp-
hy (RPC)
System CIP
Comienzo con ÄKTA avant 29-0351-83 AA
Descripción
Se llena la columna con solución amortiguadora. Seleccione las
posiciones de entrada. Ingrese la identificación, el volumen, el
caudal y el tiempo de incubación de la solución. Si se agregan
pasos, se pueden utilizar varias soluciones de preparación.
Luego del equilibrio y la aplicación de muestra, las proteínas se
eluyen de forma isocrática. Esta técnica se suele utilizar para el
intercambio de solución amortiguadora.
Luego del equilibrio y la aplicación de muestra, las proteínas se
separan y eluyen según su tamaño (primero las más grandes).
Luego del equilibrio y la aplicación de muestra (utilice una solución
amortiguadora con alta concentración salina, por ejemplo, 2 M
de sulfato de amonio), las proteínas hidrofóbicas se adsorben en
el ligando de la columna. Luego de un lavado para quitar muestras
sueltas, se realiza una elución utilizando un gradiente con una
concentración salina en disminución. Finalmente, se lava la co-
lumna y se la vuelve a equilibrar con la solución amortiguadora
de inicio.
Llena las columnas AxiChrom con un tipo de columna predeter-
minado, mediante un flujo de líquido hidráulico que empuje el
adaptador hacia abajo. El usuario comienza el inicio de la com-
presión en el punto exacto en que el adaptador alcanza la super-
ficie del lecho consolidado. El adaptador comprime el lecho de
acuerdo con el factor de llenado o la altura del lecho objetivo,
según se haya seleccionado. Dos Column Performance Test fases
(flujo ascendente/flujo descendente) se realizan automáticamente
después de que la columna AxiChrom se ha llenado.
Sólo disponible para ÄKTA avant 150.
Luego del equilibrio y la aplicación de muestra, las proteínas hi-
drofóbicas se adsorben en el ligando de la columna. Luego de un
lavado para quitar muestras sueltas, se realiza una elución gene-
rando un gradiente a partir de un solvente orgánico apolar, como
el acetonitrilo. Finalmente, se lava la columna y se la vuelve a
equilibrar.
Se llena el sistema con solución de limpieza. Seleccione, por
ejemplo, las entradas, salidas y posiciones de columna que desea
limpiar. En el método se incluyen tres fases de System CIP para
facilitar el uso de tres soluciones de limpieza diferentes. Si lo desea,
es posible agregar fases de System CIP adicionales desde Phase
Library.
5 Crear un método
5.1 Guía para la creación de métodos
5.1.2 Métodos predefinidos
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