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Longitud de onda y anchura de banda de muestra y de referencia
El detector mide la absorbancia simultáneamente a longitudes de onda desde
190 a 640 nm. Una lámpara UV proporciona buena sensibilidad en el rango
completo de longitudes de onda.
Si se tiene poco conocimiento sobre los analitos de la muestra, almacene todos
los espectros de todas las longitudes de onda. Esta estrategia proporciona
información completa, pero el disco se llena rápidamente. Es posible utilizar
los espectros para comprobar la pureza e identidad de un pico. La información
espectral también es útil para optimizar la longitud de onda de la señal croma-
tográfica.
El detector puede calcular y almacenar durante el análisis hasta 8 señales con
estas propiedades:
• longitud de onda de muestra, el centro de la banda de longitudes de onda
• la longitud de onda de referencia, el centro de la banda de longitudes de
Las señales comprenden una serie de puntos datos en el tiempo, con la absor-
bancia media en la banda de longitud de onda de muestra menos la absorban-
cia media de la banda de longitud de onda de referencia.
La señal A del método establecido de forma predeterminada para el detector
se fija en 254,0/4 de muestra, 360,0/100 de referencia, es decir, la absorbancia
promedio desde 252 a 256 nm menos la absorbancia promedio desde 310
hasta 410 nm. Como todos los analitos muestran mayor absorbancia a entre
252 y 256 nm que de 310 a 410 nm, esta señal mostrará, prácticamente, todos
los compuestos que pueden detectarse por absorbancia UV.
Muchos compuestos muestran bandas de absorbancia en el espectro.
en la página 140 muestra el espectro de ácido anísico, como ejemplo. Para
optimizar y poder detectar las concentraciones más bajas posibles del ácido
anísico, fije la longitud de onda al pico de la banda de absorbancia (es decir,
252 nm) y la anchura de banda de la muestra a la anchura de bandad de la
absorbancia (es decir, 30 nm). Una referencia de 360, 100 es adecuada.
El ácido anísico no absorbe en este rango.
Si se trabaja con concentraciones elevadas, es posible obtener mejor linealidad
por encima de 1,5 UA seleccionando una longitud de onda de muestra en un
valle del espectro, como 225 nm para el ácido anísico.
Manual de usuario del detector de diodos Agilent Serie 1200 Infinity
Optimización de la sensibilidad, la selectividad, la linealidad y la dispersión
con la anchura de banda de muestra (BW), y opcionalmente
onda con la anchura de banda de referencia.
Optimización del detector
Figura 43
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