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N N I I C C H H T T M M I I T T G G E E L L I I E E F F E E R R T T E E S S , , A A B B E E R R B B E E N N Ö Ö T T I I G G T T E E S S M M A A T T E E R R I I A A L L
Kat. Nr. 4063 SAS-MX Kammer
Kat. Nr. 1525 EPS600 Netzteil
Kat. Nr. 5328 AA
Hämokontrolle
2
Kat. Nr. 5329 ASA
2
Kat. Nr. 5330 AFSA
2
Kat. Nr. 5331 AFSC Hämokontrolle
Trockenschrank mit Umluft und einer Temperaturleistung von 60...70°C
Fixativ- / Entfärbelösung: 200ml Methanol, 100ml Eisessig und 800ml dest. Wasser mischen. In einer
fest verschlossenen Flasche aufbewahren.
Kochsalzlösung (0,85% NaCl)
Dest. Wasser
P P R R O O B B E E N N E E N N T T N N A A H H M M E E U U N N D D V V O O R R B B E E R R E E I I T T U U N N G G
Frisch entnommenes EDTA- oder Heparin-Blut als Material der Wahl. Proben können bei 2...6°C bis
zu einer Woche gelagert werden.
Kochsalzlösung gewaschene Erythrozyten verwendet werden. Somit werden mögliche Interferenzen
mit Plasmaproteinen entfernt.
a) 200µl gut durchmischtes Vollblut mit 1000µl NaCl-Lösung mischen.
b) Zentrifugieren, um die Erythrozyten zu sedimentieren.
c) 1000µl des Überstands entfernen und verwerfen.
d) Weitere 1000µl Kochsalzlösung hinzufügen und gut vermischen.
e) Die Schritte b) bis d) zwei Mal wiederholen.
f)
Nach dem letzten Zentrifugieren und Entfernen von 1000µl Überstand die verbleibende Probe
wie Vollblut behandeln. Es kann auch der gesamte Überstand entfernt und die verbleibende Probe
als gewaschenes Erythrozytenkonzentrat behandelt werden.
Alle Patientenproben / Kontrollproben mit Hämoglobin lysierendem Reagenz verdünnen, bis eine
Hämoglobinkonzentration von 0,5 - 1,5g/dl erreicht ist.
S S C C H H R R I I T T T T - - F F Ü Ü R R - - S S C C H H R R I I T T T T M M E E T T H H O O D D E E
1. Das Gel aus der Verpackung nehmen und auf ein Papiertuch legen. Die Geloberfläche mit einem
Blotter C blotten und Blotter verwerfen.
2. Die Auftragschablone so auf das Gel legen, dass die Pfeile am Rand des Gels liegen. Blotter A auf
die Schablone legen und mit einem Finger über die Schlitze der Schablone streichen, um eine gute
Haftung zu gewährleisten. Blotter A entfernen und ihn bis zur Verwendung in Schritt 5 beiseite
legen.
3. 3µl Probe in die jeweiligen Schablonenschlitze pipettieren. Probe für 5 Minuten ins Gel
diffundieren lassen.
4. Während die Probe einwirkt, 30ml Puffer in jeden der inneren Bereiche der SAS-MX-Kammer
füllen.
5. Nach Absorption der Probe den Blotter A aus Schritt 2 auf die Schablone drücken. Anschließend
Schablone und Blotter entfernen.
6. Das Gel in die Kammer spannen, Agarose nach unten, und auf übereinstimmende Polarisierung
achten (Pluszeichen auf dem Gel und Pluszeichen in der Kammer).
7. Gel-Elektrophorese durchführen: 50 Volt, 30 Minuten
8. Nach der Elektrophorese das Gel 5 Minuten in Fixativ- / Entfärbelösung tauchen.
Hämokontrolle
Hämokontrolle
Für optimale Resultate sollte zur Herstellung des Lysats in
15
SAS-MX SÄURE HB-10
Deutsch
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