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Por ejemplo, para el tratamiento bastante común de las muestras con isotiocianato de fluoresceína (FITC), se requiere la unidad
espectral número 3 ("B"), para la auramina, se utiliza unidad número 4 ("V"), para los tintes que emiten luz en el intervalo
espectral del rojo, se utiliza unidad número 2 ("G"). Para las tinciones DAPI y Hoechst, se utiliza la unidad número 6 ("U"); al
trabajar con esta unidad, el filtro se debe retirar de la ruta del haz de luz con una perilla (fig. 2, 1).
Además, haga lo siguiente:
•
coloque la muestra en la platina (fig. 2, 10) del microscopio;
•
coloque el objetivo con un aumento de 10x en la ruta del haz de luz (se recomienda comenzar el proceso de enfoque con
objetivos de aumento bajo o medio que tengan distancias de trabajo suficientemente grandes);
•
enfoque el microscopio girando las perillas (fig. 2, 12 y 13) para obtener una imagen nítida de la muestra;
•
cierre diafragma de campo y el diafragma de abertura con las perillas (fig. 1, 5 y 6);
•
mientras observa la imagen de la muestra, asegúrese de que la imagen del diafragma de campo esté centrada en el campo
del ocular (si el diafragma está desplazado, centre la imagen);
•
si la imagen del diafragma de campo está desplazada, coloque la imagen en el centro del campo con las perillas (fig. 2, 2);
•
abra el diafragma de campo con la perilla (fig. 1, 5) a lo largo del diámetro del campo del ocular, de modo que los bordes
del diafragma de campo queden ligeramente más allá del campo del ocular;
•
abra el diafragma de abertura con la perilla (fig. 1, 6), y mientras observa el campo del ocular, asegúrese de que la
iluminación sea uniforme; si es necesario, ajuste el enfoque de la lente colectora con la perilla (fig. 1, 7);
•
realice el enfoque de la muestra para la observación con cabezales binoculares de la manera que se muestra en la
subsección "Enfoque del microscopio para la observación binocular" cuando trabaje con luz transmitida;
•
inicie la investigación de las muestras observadas con breves pausas en su trabajo. Para evitar el desvanecimiento de la
muestra, es necesario interceptar el flujo luminoso de la lámpara con una perilla (fig. 2, 1).
Aumento del microscopio y diámetro de campo en la muestra
El factor de aumento total del microscopio Г durante las observaciones visuales con un cabezal binocular se determina mediante
la fórmula siguiente:
Γ
β
β
Γ
=
ob ∙
h ∙
eye
donde βob — es el aumento lineal del objetivo del microscopio;
βh — es el aumento lineal del cabezal igual a 1,0;
Гeye — es el aumento visible del ocular.
El diámetro del campo de visión de la muestra, Dob mm, se determina mediante la fórmula siguiente:
D
eye
D
ob =
β
β
ob ∙
h
donde Deye — es el diámetro del campo del ocular limitado por el diafragma de campo del ocular, expresado en mm.
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