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Paso
7
8
Nota:
Nota:
Aumento del cultivo
Los biorreactores Cellbag tienen una amplia gama de volúmenes de funcionamiento.
Esto permite el aumento de inóculo y elimina las tediosas transferencias secuenciales.
Comience con un volumen bajo en un sistema del WAVE Bioreactor de menor tamaño
y agregue medio nuevo al biorreactor Cellbag a medida que las células crezcan. Trans-
fiera a un sistema del WAVE Bioreactor más grande durante el proceso.
Una secuencia de inóculo típica es:
Paso
1
2
3
4
5
En esta secuencia, solo se hizo una transferencia al ir desde 2,5 a 500 litros de cultivo.
Esto ahorra tiempo y reduce el riesgo de contaminación. Este esquema también puede
usarse para aumentar el inóculo para biorreactores convencionales más grandes.
WAVE Bioreactor 200 y 500/1000 Instrucciones de funcionamiento 28-9846-81 AD
Acción
Pellizque el tubo del conector de muestreo unas cuantas veces para asegu-
rarse de que todo el líquido del tubo se escurra nuevamente al biorreactor
Cellbag.
Cierre la abrazadera del tubo.
Se usa una jeringa estándar o un conector luer sin aguja.
El conector de muestreo tiene un orificio bastante pequeño. Si está traba-
jando con microportadores grandes o agregados de células grandes no
utilice el conector de muestreo.
Acción
Comience con 2,5 litros de medios en el Cellbag de 50 l. Agregue inóculo.
Cuando las células alcancen una concentración de 2 a 3 × 10
agregue 7,5 l de medio a la Cellbag.
Cuando las células alcancen nuevamente una concentración de 2 a 3 × 10
células/m, agregue más medio para llevar el volumen a 25 litros.
Cuando las células alcancen una concentración de 2 a 3 × 10
transfiéralas a una Cellbag de 1000 l que contenga 75 litros de medio.
Cuando las células del Cellbag de 1000 l alcancen nuevamente una concen-
6
tración de 2 a 3 × 10
cultivo con el volumen completo.
células/ml, lleve el volumen a 500 litros y continúe el
7 Funcionamiento
7.8 Opciones de cultivo
6
células/ml,
6
6
células/m,
279
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