helena BioSciences SAS-3 Immunofix Instrucciones De Uso página 15

caractérise par un "effet de zone" (apparition d'une zone incolore cernée de colorant) Une dilution
supérieure de l'échantillon est nécessaire pour optimiser la concentration d'immunoglobuline.
2. Précipitation non spécifique dans toutes les cases.
Occasionnellement, une IFE montre une bande précipitant au même niveau dans toutes les cases.
Cela peut provenir de:
a) Immunoglobuline monoclonale de type IgM.
Les protéines monoclonales de type IgM ont tendance a adhérer sur la trame du gel. Une bande
apparaît donc dans les 5 cases. Toutefois, la chaîne lourde et ses chaînes légères correspondantes
apparaissent nettement plus colorées et mieux définies, ce qui permet l'identification de la protéine
anormale. Une dilution plus importante de l'échantillon permet d'améliorer la différenciation entre
la réaction avec l'anticoprs-IgM et la coloration non spécifique du précipité d'IgM, simplifiant ainsi
le diagnostique.
b) Taux élevé de Facteur Rhumatoîde ou d'immun-complexe.
Des échantillons présentant un taux élevé de Facteur Rhumatoîde ou d'immun-complexe peuvent
former un précipité au point de dépôt.
β-2-mercaptoéthanol peut éliminer cette réaction non spécifique (Mélanger 190 µL de dilution
d'échantillon avec 10µL de 1% DTT en solution saline ou mélanger 100µL de sérum pur avec 10µL
de solution au 1/10 de β-2-mercaptoéthanol en solution.
NOTE: Toujours travailler sous hotte avec le β-2-mercaptoéthanol).
c) Fibrinogène.
Si le fibrinogène est présent dans l'échantillon, il peut apparaître sous forme d'une très fine bande
dans toutes les cases de l'IFE. Le fibrinogène est présent dans le plasma, mais également se
retrouver dans le sérum de patient sous anticoagulant.
3. Une réaction avec les chaînes Kappa ou Lambda sans correspondance avec les chaînes
lourdes IgG, IgA ou IgM.
Les échantillons présentant cette réaction peuvent avoir une chaîne libre monoclonale ou une IgD
ou IgE monoclonale. Dans cette situation, il est nécessaire de recommencer l'IFE en substituant
les antiséra IgD et IgE à deux autres chaînes lourdes. Un défaut de réaction avec les antiséra IgD
et IgE indiquera la présence d'une chaîne légère libre.
4. Une bande dans la région des gamma sans réaction avec les antiséra.
La protéine C réactive (CRP) peut être détectée chez les patients avec une réponse inflammatoire
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aiguë . La CRP apparaît comme une bande étroite en position cathodique du protéinogramme
du patient. Une élévation de l'Alpha1-Antitrypsine et de l'Haptoglobine corrobore la présence de
CRP. Les patients avec une bande CRP présente généralement un dosage élevé de CRP.
Une bande étroite au niveau du point d'application peut parfois être du à la présence de
chylomicrons dans le sérum ou à une précipitation des protéines due à la congélation.
5. Pas de réaction avec les chaînes légères Kappa ou Lambda.
Occasionnellement un échantillon peut présenter une absence de réponse en chaîne légère malgré
la réponse en chaîne lourde. Dans ce cas, il convient d'éliminer a) Maladie des chaînes lourdes,
b) Très forte concentration de chaînes légères, induisant un excès d'antigène, c) faible
concentration de chaînes légères, d) chaînes légères atypiques ne réagissant pas avec les antiséra
courants, e) chaînes légères avec des déterminants antigéniques "cachés" (souvent rencontré avec
les IgA ou IgD). Pour obtenir un résultat définitif, il faut tester, a) des dilution plus fortes ou plus
faibles afin d'optimiser l'équivalence antigène / anticorps, b) des antiséra de plusieurs fabricant pour
Une réduction de l'échantillon grâce au DTT ou
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SAS-3 IMMUNOFIX
Réaliser l'IFE normalement.
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