helena BioSciences SAS-3 Immunofix Instrucciones De Uso página 30

IMMUNOFISSAZIONE URINE:
Tipo di Proteinuria
Urina normale
Glomerulare
Tubulare
Aumento
Immunoglobuline
LIMITI
1. Eccesso di antigene
Solitamente nelle IFE l'eccesso di antigene è dovuto per l'elevata concentrazione delle
immunoglobuline nel campione del paziente. Si evidenzia come una mancanza di colore al centro
della banda immunofissata che risulta invece più colorata ai margini. Questo viene identificato
come prozona. In tal caso si rende necessario aumentare la diluizione del campione.
2. Precipitazione non-specifica in tutte le finestre di immunoglobuline
Occasionalmente le piastre di IFE presentano delle bande di precipitazione nella stessa posizione
in tutte le finestre.
Questo può essere causato da:
a) IgM monoclonali che aderiscono alla matrice di gel comparendo in tutte e cinque le
reazioni anticorpali
Dove però l'immunoglobulina reagisce con l'antisiero specifico sia per le catene pesanti che per le
leggere. La banda risulta più netta e colorata delle altre, facilitandone così l'identificazione.
Aumentando la diluizione si migliora la distinzione tra la reazione specifica degli anticorpi delle IgM,
dalle altre non specifiche.
b) Alta titolazione di Fattori reumatoidi o Immunocomplessi
Campioni con alto titolo di fattori reumatoidi o di immunocomplessi possono mostrare un
precipitato nel punto di applicazione.
Questa reazione non specifica si può eliminare riducendo il campione con DTT o
β-2 mercaptoetanolo (Miscelare 190µl di siero diluito con 10µl di soluzione al 1% di DTT,
preparata con soluzione fisiologica allo 0.85% o miscelare 100µl di siero con 10µl di una soluzione
di β-2 mercaptoetanolo diluita 1:10 con acqua.
c) Fibrinogeno
Se il fibrinogeno è presente nel campione analizzato si avranno delle bande in tutte le finestre.
Solitamente è presente nei pazienti in terapia anticoagulante.
3. Reazioni in Kappa e Lamda ma non nelle catene pesanti
I campioni in cui si verifica questa situazione possono avere catene libere e leggere (gammopatia
monoclonale) o possono avere proteine monoclonali IgD o IgE.
l'immunofissazione sostituendo gli antisieri IgD e IgE agli antisieri delle catene pesanti (IgG /A/M).
Se non si hanno reazioni di precipitazione si può parlare di malattie delle catene leggere.
Bande osservate nel gel
Piccola banda di albumina
Albumina, alfa-1
Beta, gamma
Alfa1, alfa2, beta
gamma variabile
28
Proteine presenti
albumina
albumina, alfa1 antitripsina
transferrina, gammaglobuline
Proteina legante il retinolo,
beta2-globulina,
alfa2 microglobulina
catene leggere libere
In questo caso ripetere