Introducción A La Iluminación De Campo Oscuro - OPTIKA MICROSCOPES B-500DK Manual De Instrucciones

3.0 INTRODUCCIÓN A LA ILUMINACIÓN DE CAMPO OSCURO
La microscopía de campo oscuro es una técnica de iluminación especializada que saca provecho
de la iluminación oblicua para mejorar el contraste en muestras que también son difíciles de ver de
forma clara o nítidas bajo condiciones normales de ilunación en campo claro.
Todos nosotros estamos muy familiarizados con el aspecto y la visibilidad de las estrellas en una
noche oscura, esto a pesar de sus enormes distancias de la tierra. Las estrellas pueden ser vistas
por el marcado contraste entre su luz tenue y el cielo negro.
Este principio se aplica en campo oscuro (también llamado fondo oscuro) en microscopia, es un
método sencillo y popular para hacer que los objetos no teñidos sean claramente visibles. Estos
objetos suelen tener índices de refracción muy cerca al valor de su entorno y es difícil visionarlos en
microscopía de campo claro convencional. Por ejemplo, muchos pequeños organismos acuáticos
tienen un índice de refracción entre 1.2 y 1.4, lo que resulta en una diferencia óptica insignificante a
partir del medio acuoso circundante. Estos son los candidatos ideales para la iluminación de campo
oscuro.
La iluminación de campo oscuro bloquea el paso de la luz central, que normalmente pasa a través
y alrededor de la muestra, lo que permite los rayos oblicuos pasar por todos los angulos y direc-
tamente hacia la muestra. La lente superior de un condensador Abbe simple de campo oscuro es
esféricamente cóncava, permitiéndo que los rayos de luz emergentes desde todos los ángulos de
su superficie forma un cono de luz invertido con un vértice centrado en el plano de la muestra. Si no
hay ninguna muestra y la A.N. del condensador es mayor que la del objetivo, los rayo oblicuos se
cruzan y no entran al objetivo debido a su oblicuidad. El campo de visión aparece oscura.
El objetivo/condensador (especial) ilustrados en la figura 3 tiene una gran A.N. que representa la
microscopía de campo oscuro más sofisticado. El objetivo contiene un diafragma iris interno que
se usa para reducir la A.N. del objetivo a valores por debajo del cono de luz invertido emitido por el
condensador. El diseño del condensador de campo oscuro depende the espejos internos que pro-
yectan un cono de luz libre de aberraciones sobre el plano de la muestra.
Cuando se pone una muestra sobre la preparación, especialmente sin teñir, los rayos oblicuos cru-
zan la muestra y se difractan, refractan y/o reflejan por discontinuidades ópticas (como membrana
celular, núcleo y orgánulos internos) permitiéndo que éstos rayos tenues penetren en el objetivo,
entonces en la muestra aparecen los organismos brillantes sobre un fondo oscuro.
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