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Optimización del detector
Correspondencia entre la celda de flujo y la columna
• Si se utilizan columnas más largas (> 50 mm) para obtener mayor resolu-
Longitud de paso de la celda de flujo
La ley de Lambert-Beer muestra una relación lineal entre la longitud de paso
de la celda de flujo y la absorbancia.
donde
T
e
C [mol/L] es la concentración de las especies absorbentes.
d [cm]
Por tanto, las celdas de flujo con longitudes de paso más largas dan lugar a
señales mayores. Aunque el ruido aumenta normalmente poco al aumentar la
longitud de paso, hay cierta ganancia en la relación señal-ruido. Por ejemplo,
en
obtuvo un aumento del 70 % en la intensidad de la señal con el aumento de la
longitud de paso de 6 mm a 10 mm.
Al aumentar la longitud de paso, también aumenta normalmente el volumen
de la celda, en el ejemplo, 5 – 14 µL. En general, esto da lugar a una mayor dis-
persión de los picos. Como se ha demostrado, esto no afecta a la resolución en
la separación del gradiente en el ejemplo que se muestra a continuación.
Como norma, el volumen de la celda de flujo debe ser aproximadamente 1/3
del volumen del pico a media altura. Para determinar el volumen de los picos,
tome la anchura de pico obtenida en los resultados de integración, multiplí-
quela por la velocidad de flujo y divídala por 3.
118
Manual de usuario del detector de longitud de onda variable de la serie Agilent 1200 Infinity
zar el amortiguador y el mezclador para obtener la mayor relación
señal-ruido.
ción, la mayor celda de flujo siguiente será la opción favorita para lograr
más sensibilidad.
es la transmisión, definida como el cociente entre la intensidad de la luz emitida I y la
intensidad de la luz incidente I
es el coeficiente de extinción, que se trata de una característica de una sustancia dada
según unas condiciones claramente determinadas de longitud de onda, disolvente,
temperatura y otros parámetros.
es la longitud de paso de la celda utilizada para la medida.
Figura 55
en la página 119, el ruido aumentó menos del 10 %, pero se
.
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