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Uso del sistema de espectroscopía UV-visible
¿Cuándo es necesario realizar una medida del blanco?
¿Cuándo es necesario realizar una medida del blanco?
Los datos de medida adquiridos por el espectrofotómetro son independientes
del instrumento. Para conseguir esta independencia, debe realizarse una
medida de referencia. Todas las medidas sucesivas se referirán a la última
referencia medida.
En el software Agilent ChemStation, la medida de referencia se combina con
una medida de la línea base. La línea base mostrada ofrece información acerca
de la calidad de la referencia actual. En el modo de absorbancia, los datos
deben estar próximos a 0 UA; y, en el modo de transmisión, los datos deben
aproximarse al 100 %.
Normalmente, las medidas de referencia para muestras disueltas se realizan
con la celda llena del disolvente utilizado. Las propiedades de absorbancia de
la celda y el disolvente también influyen sobre los datos de referencia. En los
rangos de longitud de onda absorbidos por el disolvente o la celda, el ruido del
espectro de la línea base será elevado. En estas zonas, no se podrán obtener
datos fiables para las muestras.
Por tanto, será necesario realizar nuevas medidas de referencia o del blanco
cuando:
• se cambien la celda de medida o la orientación de esta en relación con la
• se utilice un disolvente diferente o incluso un lote distinto del mismo
• se prolongue excesivamente el tiempo transcurrido entre la medida de
• las condiciones temporales dependan del ritmo de envejecimiento de las
Para garantizar una precisión máxima de la medida de la muestra, la medida
del blanco debe realizarse justo antes de la medida real de la muestra.
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posición de medida;
disolvente;
referencia y la medida de la muestra; o,
lámparas y de posibles cambios en las condiciones ambientales
(normalmente, la última medida del blanco deberá haberse realizado media
hora antes como máximo).
Guía del usuario del sistema de espectroscopía UV-visible Agilent Cary 8454
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