Principio De Operación - Hanna Instruments HI801 Manual De Instrucciones

4.3. PRINCIPIO DE OPERACIÓN
La absorción de la luz es un fenómeno típico de la interacción entre la radiación electromagnética y la materia.
Un espectrofotómetro separa la radiación electromagnética (luz blanca) en las longitudes de onda que la componen y de manera
selectiva mide la intensidad de la radiación después de que a través de una muestra
La luz blanca pasa por un prisma para dispersar la luz en bandas de color. Estas bandas de color conforman el espectro de luz
visible y se correlacionan con la longitud de onda.
Cuando un haz de luz atraviesa una sustancia, parte de la radiación puede ser absorbida por los átomos, moléculas o redes
cristalinas. Si ocurre absorción pura, la fracción de la luz absorbida depende tanto de la longitud del trayecto óptico a través de la
materia como de las características fisicoquímicas de la sustancia, de acuerdo a la ley de Beer-Lambert:
T = transmitancia
A = absorbancia
I = intensidad del haz de luz incidente
= intensidad del haz de luz después de la absorción
I
0
e
= coeficiente de extinción molar a la longitud de onda λ
l
c = concentración molar de la sustancia
d = trayectoria óptica a través de la sustancia
La concentración "c" puede calcularse a partir de la absorbancia de la sustancia, ya que los otros factores son constantes.
El análisis fotométrico se basa en las reacciones químicas específicas que suceden entre la muestra y un reactivo para producir un
compuesto con la capacidad de absorber la luz.
10
Longitud de onda (nm)
400
435
495
560
650
800
Color absorbido Color transmitido
Morado Amarillo-verde
Azul
Verde
Amarillo
Anaranjado Azul verdoso
Rojo Verde azulado
T=I/I
0
-log I/I = e c d
l
0
o
A = e
c d
l
I
0
Haz de luz
incidente
Amarillo
Morado
Azul
I
Haz de luz transmitido
(haz de luz después de
la absorción)