14.2
Tratamiento de imágenes de fluorescencia
El módulo de fluorescencia utiliza cuatro canales de color, que corresponden a las clases de tinte más
habituales: DAPI/Hoechst, FITC, TIRTC y Cy5.
Gracias a la innovadora arquitectura de hardware del módulo Cell Imager, se analizan las muestras y se
obtienen imágenes tanto de fluorescencia como de campo claro usando el mismo sistema de
autoenfoque basado en astigmatismo, los mismos objetivos y la misma cámara. No obstante, en
contraste con el módulo de campo claro, las muestras fluorescentes se iluminan y detectan desde la
base.
14.2.1
Canales de fluorescencia y sus perfiles de excitación y de
emisión
En SparkControl pueden seleccionarse cuatro LEDs distintos y sus filtros de excitación correspondientes.
La siguiente tabla facilita información acerca de las longitudes de onda de excitación y emisión que
proporciona el módulo de fluorescencia:
Canal
Azul
Verde
Rojo
Rojo lejano
Los tiempos de exposición y la desviación del enfoque automático se pueden optimizar empleando el
modo de microscopio de SparkControl, el Live Viewer.
14.2.2
Adquisición de imágenes
Si se excita a la longitud de onda apropiada, la muestra (1) emite una señal de fluorescencia, que de
nuevo se pasa a través del filtro de dicroico multibanda (2) y se dirige mediante lentes tubulares (3) hasta
la cámara (4).
126
Instrucciones de uso - Guía básica - SPARK - N.º de pieza 30124655 - Versión 2.0
λ
ex
381 - 400 nm
461 - 487 nm
543 - 566 nm
626 - 644 nm
λ
em
414 - 450 nm
500 - 530 nm
580 - 611 nm
661 - 800 nm
2021-06