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¡Atención! Use gafas de
seguridad UV y proteger la piel
cuando se utiliza una lámpara
de rayos UV.
Nota: Consulte los tampones,
los volúmenes, y la sección de
notas para obtener información
adicional y las directrices en la
página 10.
Consulte la página 12 para
obtener una receta de la
muestra de tampón de carga
y los volúmenes de diversos
tamaños y peine en geles de
diferentes grosores.
¡Importante! Si se ejecuta dos
conjuntos de muestras en un
gel, controlar la ejecución de
cerca y detener la electroforesis
cuando el colorante marcador
se aproxima a los pocillos en
el centro.
Preparación para la electroforesis
1
Opcional: Para controlar el progreso de separación,
o bien añadir 0,5 µg/ml (concentración final.) De
bromuro de etidio para el funcionamiento de amor-
tiguación ahora o añadir 50 µg/ml (concentración
final). Bromuro de etidio a la muestra de amortigua-
ción. Para visualizar el progreso, apague la fuente de
alimentación, retire el conjunto de la tapa, y mantener
una lámpara UV portátil cerca del gel.
Nota: La adición de bromuro de etidio para el funcio-
namiento de amortiguación o de la muestra disminuye
la migración ligeramente. Detección por este método
no es tan sensible como por tinción después de la
carrera de electroforesis. Vea la sección de detección
de ADN, para más detalles (página 14).
2
Llenar la cámara con el tampón hasta que el gel se
sumerge ~ ~ 1 mm.
3
Cargar las muestras. Añadir la muestra a 1/5 del
volumen del tampón de carga de la muestra. Mezclar
cada muestra y la carga en un pozo con una pipeta de
micro, teniendo cuidado de evitar la perforación de la
parte inferior o bien atrapar burbujas.
4
Colocar la tapa en la unidad de manera que el cátodo
(cable negro) está en el extremo más cercano a las
muestras. (Muestras de ácidos nucleicos migran hacia
el ánodo.)
5
Conecte los cables codificados por colores (rojo con
rojo y negro con negro) a una fuente de alimentación
aprobada. Ajuste la tensión y temporizador (si está
disponible). Los geles de agarosa se e jecutan normal-
mente a una tensión constante bajo un gradiente de
voltaje en el intervalo de 2-5 V/cm. La distancia entre
los electrodos es de ~ ~ 26 cm, por lo que un ajuste de
130 V en los resultados de un gradiente de 5 V/cm.
•
p7
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