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rencia de cada tipo de muestra se enumeran más
adelante en esta sección.
Factores que afectan a la transferencia
Los parámetros tales como características de la
muestra, el tipo de membrana, el tamaño de los
poros de gel y el tampón de transferencia utili-
zados contribuyen a la transferibilidad de las
macromoléculas, y debe tenerse en cuenta cuando
se desarrolla un protocolo. Especies moleculares
muy pequeñas, por ejemplo, migran rápidamente,
pero a menudo no se unen así como las molécu-
las más grandes; grandes moléculas se unen de
manera más eficiente, pero no eluir del gel tan
rápidamente. La velocidad de elución también se
ve afectada por el tamaño de los poros del gel y
la orientación de las moléculas.
Además, el grado en que las moléculas se unen a
la membrana está influenciada por las caracterís-
ticas de la membrana, tales como el tamaño de
poro y el tipo y las características de amortigua-
miento como el tipo de sal, pH y concentración,
y la presencia de detergentes tales como dodecil-
sulfato sódico (SDS). Condiciones necesarias para
la elución eficiente puede no coincidir con las
condiciones óptimas para la unión. Para encon-
trar las condiciones óptimas para la transferencia
de la muestra, un equilibrio entre estos efectos:
Si la velocidad de elución de la muestra es lento,
un período de tiempo de transferencia puede ser
requerida. (En nuestra experiencia, bajo las trans-
ferencias de tensión por períodos más largos no
ofrecen grandes mejoras.) Si el enlace de la mues-
tra es inadecuada, pruebe las diferentes condi-
ciones de amortiguamiento. Para una revisión
completa, consulte Gershoni y Palade (1983).
Si el sistema tampón de transferencia es diferente
del sistema de tampón de electroforesis, el gel
debe ser equilibrada con el tampón de transfe-
rencia antes de la transferencia para asegurar la
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