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Geles de acrilamida
1
Preparar la solución de monómero y verter el gel. Preparar
la cantidad necesaria de solución de monómero. Purgar
y añadir el iniciador y el catalizador justo antes de
verter el gel. Pipetear la solución en una esquina del
sándwich, teniendo cuidado de no introducir burbujas
de aire. Véase más abajo para el nivel de la solución
apropiada de acuerdo con la aplicación.
No gel de apilamiento (sistema continuo). Solución de
llenado hasta justo debajo de la parte superior del
borde de la placa superior. Si las burbujas se encuen-
tran atrapados, retire con una pipeta o una jeringa.
Introducir un peine (con un ligero ángulo) en cada
sándwich, teniendo cuidado de no atrapar burbujas
de aire debajo de los dientes.
Club sándwich. Pipetear la solución en ambos
emparedados, llenando cada uno al mismo nivel por
debajo del borde con muescas.
Gel de apilamiento. Completa solución a 3-4 cm por
debajo de la parte superior de la placa de vidrio. Esta
altura permite 1 cm de gel de apilamiento por debajo
de los pozos. Verter el gel y aplicar una plantilla (ver
paso 2). Después el gel se establece, preparar el gel
de apilamiento, como se describe a continuación.
La 2-D electroforesis (sistema de la proteína disconti-
nua). Completa solución de monómero de aproxima-
damente 1 cm por debajo de la parte superior de la
placa de cristal para permitir 4 a 5 mm para la tira
IPG o gel de tubo y un sello de agarosa. (Un gel de
apilamiento se requieren espacio adicional). Selle la
tira IPG o gel tubo en su lugar con la agarosa disuelta
en la gestión de memoria intermedia. Tenga cuidado
de no atrapar burbujas de aire entre los geles de
primera y segunda dimensión.
2
Superponer cada gel con una delgada capa de agua-
butanol saturado, agua o tampón de gel diluida para
•
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